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批量离子交换层析和凝胶过滤层析在类人胶原蛋白Ⅰ纯化中的应用
  • ISSN号:1001-5493
  • 期刊名称:《离子交换与吸附》
  • 时间:0
  • 分类:TQ028.3[化学工程]
  • 作者机构:[1]西北大学生物工程系,西安710069, [2]西安工程科技学院生物工程系,西安710048
  • 相关基金:国家科技攻关重大专项(2003DA901A32);国家自然科学基金(20476085)
中文摘要:

研究了利用批量离子交换层析与凝胶过滤层析相结合的方法纯化类人胶原蛋白Ⅰ的最佳条件。分别考察了不同离子交换树脂、缓冲溶液pH、离子强度、进料蛋白浓度对批量离子交换的影响,以及不同凝胶过滤介质对凝胶过滤层析的影响。结果表明,采用阴离子交换树脂DEAE52吸附杂蛋白,缓冲液pH为7.0,NaCl浓度为0.2mol/L,进料蛋白浓度为40mg/mL,并采用凝胶过滤介质Sephadex G-100进一步纯化后,类人胶原蛋白Ⅰ的纯度可达到98.2%,总纯化倍数为3.1,总回收率为80.6%。SDS—PAGE分子量分析和N末端氨基酸序列分析均表明纯化后的类人胶原蛋白Ⅰ与基因设计一致。

英文摘要:

The method of batch ion exchange chromatography combined with gel filtration chromatography to purify Human-like Collagen Biopolymer Ⅰ was investigated. The different ion exchange resins, pH and ionic strength of buffer solution, the feed concentration of protein and different gel filtration resins were compared. The results showed that applying anion exchange resin DEAE52, pH of buffer solution was 7.0, the NaCl concentration was 0.2mol/L, the feed concentration of protein was 40mg/mL and applying gel filtration resin Sephadex G- 100, were more effective. The purity of Human-like Collagen Biopolymer Ⅰ could reach 98.2% and the purification fold multiple was 3.1. The total recovery ratio was 80.6%. The molecular weight and N terminus amino acids sequence analysis showed which consistent with that deduced from DNA sequence.

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期刊信息
  • 《离子交换与吸附》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:教育部
  • 主办单位:南开大学
  • 主编:张全兴
  • 地址:天津南开大学
  • 邮编:300071
  • 邮箱:LZJHYXF@NANKAI.EDU.CN
  • 电话:022-23503511
  • 国际标准刊号:ISSN:1001-5493
  • 国内统一刊号:ISSN:12-1147/O6
  • 邮发代号:6-57
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),荷兰文摘与引文数据库,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:8646