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真核表达质粒pIRES_2-eGFP-Annexin A2的构建及其在293T细胞中的表达
  • ISSN号:1671-7783
  • 期刊名称:《江苏大学学报:医学版》
  • 时间:0
  • 分类:R329.2[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学;医药卫生—基础医学] Q343[生物学—遗传学]
  • 作者机构:[1]江苏大学基础医学与医学技术学院,江苏镇江212013, [2]浙江省中医院检验科,浙江杭州310006
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30670907);浙江省自然科学基金资助项目(Y206830)
中文摘要:

目的:构建含有人Annexin A2基因的真核表达质粒pIRES2-eGFP-Annexin A2,并在真核细胞293T中表达。方法:将质粒pCMV5-Annexin A2上Annexin A2基因酶切后与真核表达质粒pIRES2-eGFP连接,酶切鉴定及测序正确后,脂质体介导法转染293T细胞,荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测其基因和蛋白的表达。结果:构建的质粒pIRES2-eGFP-Annexin A2转染293T细胞后,目的基因mRNA和蛋白表达均明显增高。结论:成功构建pIRES2-eGFP-Annexin A2质粒并表达蛋白,为研究Annexin A2的生物学功能奠定了基础。

英文摘要:

Objective: To construct pIRES2-eGFP-Annexin A2 eukaryotic expression vector carrying human Annexin A2 gene and express Annexin A2 protein in 293T cell.Methods: Annexin A2 gene digested from pCMV5-Annexin A2 was ligated into eukaryotic expression vector pIRES2-eGFP.After restriction analysis and sequencing,the recombinant plasmid pIRES2-eGFP-Annexin A2 was transfected into 293T cells in the mediation of liposome.The expression of Annexin A2 was analyzed by western blot and real-time PCR. Results: The expression of Annexin A2 at both mRNA and protein levels were significantly increased when transfected with pIRES2-eGFP-Annexin A2 in 293T cells. Conclusion: The eukaryotic expression vector pIRES2-eGFP-Annexin A2 was correctly constructed and the Annexin A2 protein was successfully expressed in 293T cells.This will facilitate the following study on Annexin A2.

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期刊信息
  • 《江苏大学学报:医学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:江苏省教育厅
  • 主办单位:江苏大学
  • 主编:许化溪
  • 地址:江苏省镇江市梦溪园巷30号
  • 邮编:212003
  • 邮箱:
  • 电话:0511-84446824
  • 国际标准刊号:ISSN:1671-7783
  • 国内统一刊号:ISSN:32-1669/R
  • 邮发代号:28-192
  • 获奖情况:
  • 1995年、1999年被评为江苏省优秀学报
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,美国剑桥科学文摘,中国中国科技核心期刊
  • 被引量:6001