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棉花腺体形成时均一化cDNA文库的构建
  • ISSN号:0490-6756
  • 期刊名称:《四川大学学报:自然科学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q78[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]重庆邮电大学生物信息学院,重庆400065, [2]重庆大学生物工程学院,重庆400004
  • 相关基金:国家自然科学基金(30440032;30771311);重庆市自然基金(cstc2007BB1328)
中文摘要:

为克隆筛选棉花腺体形成相关的基因,运用SMART技术构建eDNA文库.首先抽提棉花腺体形成时期的mRNA,mRNA逆转录后合成eDNA,经均一化处理后,Sfi I酶切,连接质粒载体,电转化,成功构建了棉花腺体形成时期的eDNA文库,经鉴定原始文库滴度为5.8×10^5cfu/mL,其重组率高达94%,插入片段的平均长度约为1.4kb.

英文摘要:

A Normalized cDNA library was constructed from upland cotton during its pigments gland forming age with SMART(switching mechanism at 5 end of RNA transcript) technique using Creator SMART cDNA library construction kit. mRNAs were isolated from upland cotton using Reagent; Double-stranded cDNAs were synthesized from mRNAs and were processed by normalization and Sfi I and then the cDNAs were ligated to pDNR-LIB vector. The ligation mixture was transformed into E. coli JM109 by electroporation. Counting the number of colonies, the titer was 5.86 × 10^5 cfu/mL in this library. Electrophoresis gel results fragments ranged from 800 bp to 2 kb, with an average size of 1400 bp. Random picking clones showed that the recombination rate was 94 %. Our successfully constructed cDNA library is a full-length library with high quality, and can be used to screen the genes related to development of pigments gland cottons.

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期刊信息
  • 《四川大学学报:自然科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:国家教育部
  • 主办单位:四川大学
  • 主编:刘应明
  • 地址:成都九眼桥望江路29号
  • 邮编:610064
  • 邮箱:
  • 电话:028-85410393 85412393
  • 国际标准刊号:ISSN:0490-6756
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1595/N
  • 邮发代号:62-127
  • 获奖情况:
  • 国家“双效”期刊,四川省十佳科技期刊,教育部全国高校优秀学报二等奖(1995,1999),四川省科技优秀期刊一等奖(1996,2000)
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),德国数学文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:10542