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Geobacillus sp.POT5 α-淀粉酶基因的克隆及表达
  • ISSN号:1000-2367
  • 期刊名称:《河南师范大学学报:自然科学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q93[生物学—微生物学]
  • 作者机构:[1]河南师范大学生命科学学院,河南新乡453007, [2]中国农业科学院生物技术研究所,北京100081
  • 相关基金:国家自然科学基金(30670082)
中文摘要:

从高温环境土壤中分离到1株能在75℃生长并产生α-淀粉酶的菌株(POT5),扩增了其16Sr DNA核苷酸序列,序列分析表明该菌属于Geobacillus属.根据该属全基因序列测定数据中推定的α-淀粉酶基因,利用PCR方法从G.sp.POT5基因组中扩增得到该菌α-淀粉酶基因(amyP).序列分析表明该基因全长1.545 kb、G+C含量51.33%,编码514个氨基酸.构建重组表达质粒pET22b(+)-amyP,转化Escherichia coliBL21系统,表达产物经SDS-PAGE分析、活性染色及淀粉酶活力分析,表明amyP基因得到了表达,且产物具有生物学活性.

英文摘要:

A strain of bacterium which can grow at the temperature of 75℃ and secrete a-amylases was isolated from soil of thermal environment. It was identified as Geobacillus sp. according to the analysis of 16S rDNA nucleotide sequence. The gene of a-amylases(amyP)was amplified from the genome of G. sp. POT5 by PCR. Sequence analysis indicated that the gene was 1 545 bp in full size with 51. 33% content of G+C, encoding 514 amino acids. The recombinant expression vector pET22b (+)--amyP was constructed and transformed into Escherichia coli BL21, the expressed product was detected through SDS- PAGE, active-staining and activity analysis of a-amylase.

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期刊信息
  • 《河南师范大学学报:自然科学版》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:河南师范大学
  • 主办单位:河南师范大学
  • 主编:王记录
  • 地址:河南省新乡市建设东路46号
  • 邮编:453007
  • 邮箱:
  • 电话:0373-3329394 3329272
  • 国际标准刊号:ISSN:1000-2367
  • 国内统一刊号:ISSN:41-1109/N
  • 邮发代号:36-55
  • 获奖情况:
  • 国家新闻出版局、国家科委优秀学报奖,河南省科委、河南省教委优秀学报
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,德国数学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:7535