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多重PCR检测病死鸡中沙门氏菌方法的研究
  • ISSN号:0490-6756
  • 期刊名称:《四川大学学报:自然科学版》
  • 时间:0
  • 分类:S852.61[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]四川大学生命科学学院动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室、生物资源与生态环境教育部重点实验室、“985工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台,成都610064
  • 相关基金:国家基础研究计划973项目(2013CB127200);国家公益性行业(农业)科研专项经费项目(201303044),(201403054);国家“现代农业产业技术体系建设专项资金”项目(CARS-41-K09);四川省公益性科研专项(2013NZ0025);四川省蛋鸡产业链项目(2011NZ0073);四川省肉鸡产业链项目(2012NZ0037)
中文摘要:

为了建立能够同时检测病死鸡样品中的沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌和肠炎沙门氏菌的多重PCR 方法.采用煮沸法提取 DNA 做为模板,选择分别针对沙门氏菌属、鸡白痢沙门氏菌和肠炎沙门氏菌的特异性基因(invA、fliC、sdfⅠ)设计引物,优化反应体系和反应参数,建立多重PCR检测方法.应用该方法对国内17家鸡场369份病死鸡样品进行沙门氏菌的检测,检测结果与传统细菌培养法的结果进行比较.结果表明,优化过的多重 PCR 可同时对沙门氏菌种、属进行鉴定,灵敏度为4.6×10^2 CFU/mL;多重 PCR 方法共检测出沙门氏菌34株,其中鸡白痢沙门氏菌21株、肠炎沙门氏菌5株,与传统细菌培养法检测结果的符合率分别为91.2%、90.5%和80.0%.

英文摘要:

To establish the multiplex PCR which could detect Salmonella,Salmonella pullorum and Salmonella enteritidis,simultaneously.The genomic DNA of bacteria was extracted by the boiling method,and the specific genes (invA,fliC,sdfⅠ)of Salmonella,Salmonella pullorum and Salmo-nella enteritidis were selected to disign primers for establishing the multiplex PCR method ,and then the specificity and sensitivity of multiplex PCR were tested;At the same time,3 6 9 samples from 1 7 farms were detected by multiplex PCR,the results of the test were compared with the traditionaldetec-tion methods.The results showed that the Salmonella species could be tested simultaneously by the op-timized multiplex PCR,its sensitivity d was 4.6×10^2 CFU/mL;The number of Salmonella,Salmonel-lapullorum and Salmonellaenteritidis which detected by the multiplex PCR was 34,21 and 5 ,respec-tively,the coincidence rate with traditional bacteria culture method was 91.2%,90.5% and 80.0% , respectively.

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期刊信息
  • 《四川大学学报:自然科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:国家教育部
  • 主办单位:四川大学
  • 主编:刘应明
  • 地址:成都九眼桥望江路29号
  • 邮编:610064
  • 邮箱:
  • 电话:028-85410393 85412393
  • 国际标准刊号:ISSN:0490-6756
  • 国内统一刊号:ISSN:51-1595/N
  • 邮发代号:62-127
  • 获奖情况:
  • 国家“双效”期刊,四川省十佳科技期刊,教育部全国高校优秀学报二等奖(1995,1999),四川省科技优秀期刊一等奖(1996,2000)
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),德国数学文摘,美国生物科学数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:10542