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乙烯应答因子W17基因RNAi表达载体的构建及小麦遗传转化
  • ISSN号:1007-4333
  • 期刊名称:中国农业大学学报
  • 时间:2013.2.15
  • 页码:16-24
  • 分类:S512[农业科学—作物学]
  • 作者机构:[1]西北农林科技大学农学院/旱区作物逆境生物学国家重点实验室,陕西杨凌712100, [2]中国农业科学院作物科学研究所/国家农作物基金资源和基因改良重大科学工程/农业部作物遗传改良与育种重点开放实验室,北京100081
  • 相关基金:国家自然科学基金项目(31171546); 转基因生物新品种培育重大专项(2011ZX08002-002)
  • 相关项目:小麦抗旱相关ERF转录因子介导的信号传递网络解析
中文摘要:

干旱、高盐和病虫害严重影响了作物的产量和品质。ERF(ethylene responsive factor)转录因子是介导生物和非生物胁迫响应的重要调控因子。本实验室从小麦中克隆到抗逆相关ERF转录因子W17基因,本研究以植物表达载体pAHC25为基础,构建了含有反向重复序列的RNAi表达载体pAHC-W17RNAi。采用基因枪法45枪轰击小麦品种新春9号幼胚材料2 379个,共获得115株T0代再生植株,其中12株为阳性转基因植株。半定量RT-PCR分析表明,转基因植株中W17基因及其调控的下游基因的表达水平均显著下降;表型鉴定发现转基因小麦苗期发育受到抑制。本研究为深入分析小麦ERF基因的功能与作用机制,进而通过分子育种进行小麦抗性改良奠定了基础。

英文摘要:

Drought,high salinity,insect pest,and disease have adverse effect on the yield and quality of crops. Ethylene responsive factors (ERFs) are involved in plant response to abiotic and biotic stress. In this study, according to the sequence of an ERF family gene W17 from wheat, the W17 RNAi expression vector Pahc25-W17RNAi containing inverted-repeat sequences of W17 was constructed and transformed into wheat variety Xinchun 9 using particle bombardment. In total,2379 embryos were bombarded. A total of 115 regenerated plants with resistance to Bialaphos were obtained. Among them, 12 transgenic lines with Bar gene were identified. Semi-quantitative RT-PCR showed that the expression of W17 gene and its downstream genes decreased significantly. Meanwhile, phenotype appraisal found that the growth of transgenic wheat in seedling stage was also inhibited. This study is useful for deep analysis of the function of ERF genes and preliminary investigation into the mechanism of ERF proteins; furthermore, it establishes the foundation for improving the wheat resistance by molecular breeding.

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期刊信息
  • 《中国农业大学学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:教育部
  • 主办单位:中国农业大学
  • 主编:李保国
  • 地址:北京海淀区圆明园西路2号
  • 邮编:100094
  • 邮箱:xuebao@cau.edu.cn
  • 电话:010-62732619
  • 国际标准刊号:ISSN:1007-4333
  • 国内统一刊号:ISSN:11-3837/S
  • 邮发代号:
  • 获奖情况:
  • 中国期刊方阵“双效”期刊
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),中国北大核心期刊(2000版)
  • 被引量:21575