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重组质粒pIRES-EGFP-BCL 11B电转染幼稚T细胞的可视化研究
  • 期刊名称:分析测试学报
  • 时间:0
  • 页码:1389-1395
  • 语言:中文
  • 分类:TH742.65[机械工程—光学工程;机械工程—仪器科学与技术;机械工程—精密仪器及机械] Q319.34[生物学—遗传学]
  • 作者机构:[1]暨南大学生命科学技术学院化学系,广东广州510632, [2]暨南大学医学院微生物学免疫学教研室,广东广州510632
  • 相关基金:国家自然科学基金资助项目(30872404);海外及港澳学者合作研究基金资助项目(30828028)
  • 相关项目:扫描探针显微术加量子点示踪研究特异性T细胞的抗原识别和活化
中文摘要:

将BCL11B基因插入pIRES—EGFP构建重组质粒真核表达载体pIRES—EGFP—BCL11B,采用电转染法将重组质粒转入人幼稚T细胞,转染24h后,用原子力显微镜(AFM)观察转染前后细胞的表面形态以及生物物理性质的变化。转染72h后,用CCK-8试剂检测幼稚T细胞的增殖情况。分别对空转的幼稚T细胞组、空载体转染组(pIRES—EGFP naked plasmid)、重组载体转染组(pIRES—EGFP—BCL11B recombinant vectot)、无电转无质粒的幼稚T细胞组进行实验。结果表明,4组幼稚T细胞的体积、高度、半宽度、粗糙度、表面颗粒大小等参数发生了变化,细胞杨氏模量以及细胞硬度也呈现很大变化,CCK-8结果显示,重组质粒pIRES—EGFP—BCL11B电转染人幼稚T细胞后影响细胞的增殖。

英文摘要:

BCL 11B were inserted into pIRES-EGFP eukaryotic expression vector to construct recombinant pIRES-EGFP-BCL 11B plasmid. The plasmid was transfected into human naive T cell by electroporation. The atomic force microscope was used to analyze the morphology and mechanical property after transfected twenty-four hours, and CCK-8 was used to detected the proliferation of naǐve T after transfected seventy-two hours. The experiment were divided into four groups, e. g. only transfection, plRES-EGFP naked plasmid, plRES-EGFP-BCL 11B recombinant vector and no transfection or plasmid. The result showed that the morphology, ultrastructure, Young's modulus and stiffness of different four naǐve T cell changed greatly after transfection, and BCL 11B could promote the proliferation of naǐve T cell of human.

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