扫描探针显微镜能够探测单个大分子在细胞表面和细胞内的运动而不损害细胞。量子点标记有荧光寿命长、激发谱宽、发射谱窄的优点。我们利用近场光学显微镜实现了突破衍射极限的50nm高分辨;采用量子点标记细胞分子并利用电子调谐的方法达到同时原位探测两种或三种细胞表面分子的分布;利用针尖化学方法,将修饰有特异性抗体分子的原子力显微镜针尖原位测量细胞表面单个抗原-抗体分子的相互作用力。利用上述高分辨、高精度的实验方法,研究了各种T细胞(如CD4+、CD8+、Jurkat T细胞等)表面抗原分子(如CD8、CD69、CD59、GM1脂筏等)在不同的药物、病原体刺激前后在细胞表面分布的变化、抗原-抗体相互作用力的变化和生物物理性质的变化。如首次证明了T细胞活化过程中CD69分子在细胞表面的纳米机械性质及分布特征;青蒿琥酯(ART)能抑制Jurkat T细胞的分化、改变细胞的机械性质;发现了PDB刺激的CD8+T细胞表面粘附力增加;低温诱导脂筏标记GM1与CD59形成了共定位的纳米簇和异质性的功能生物膜等。这将为抗病菌、病毒和抗肿瘤疫苗的制备提供重要实验和理论依据。
英文主题词scanning probe microscopy; Quantum dots; T cell; single molecule detection