中文摘要：

国内首次成功地构建了携带DHFR和MDR1双耐药基因的重组逆转录病毒载体pSF-DIM。通过上清交叉感染的方法，获得了较高滴度的分别携带DHFR和MDR1双耐药基因逆转录病毒载体包装细胞，NUH3T3细胞放大实验检测无辅助病毒产生。采用免疫磁珠法分离获得的人脐血CD34+细胞纯度达82—94%，经IL-3/IL-6/SCF/FL因子组合体外扩增5天后纯度仍可在85.85%。在国内外首次将携带DHFR和MDR1的逆转录病毒载体pSF-DIM转导入人脐血CD34+细胞，获得了双耐药基因在人造血干祖细胞的共表达。体外实验证明，在一定浓度水平，增加了对于Taxol和MTX的抗药性，拓宽了造血细胞的耐药谱。

结论摘要：

国内首次成功地构建了携带DHFR和MDR1双耐药基因的重组逆转录病毒载体pSF-DIM。通过上?褰徊娓腥镜姆椒ǎ竦昧私细叩味鹊姆直鹦鳧HFR和MDR1双耐药基因逆转录病毒载体包装?赴赴糯笫笛榧觳馕薷ㄖ《静２捎妹庖叽胖榉ǚ掷牖竦玫娜似暄狢D34+细胞纯度达82-94%，经IL-3/IL-6/SCF/FL因子组合体外扩增5天后纯度仍可在85.85%。在国外首次将?鳧HFR和MDR1的逆转录病毒载体pSF-DIM转导入人脐血CD34+细胞,获得双耐药基因在人造血干祖细胞的共表达。体外实验证明，在一定浓度水平，增加了对于和的抗药性，拓宽了造血细胞的耐药谱。国内首次成功地构建了携带DHFR和MDR1双耐药基因的重组逆转录病毒载体pSF-DIM。通过上?