光滑球拟酵母是工业化生产丙酮酸的菌株,其胞内NADH代谢模式对其高效合成丙酮酸发挥重要作用。本研究在建立一种针对单倍体的光滑球拟酵母线粒体基因组的基因敲除方法的基础上,采用代谢工程策略和组学研究方法,详细阐释了NADH再生途径及其亚细胞结构中的含量对碳主流代谢途径及抵御环境胁迫的生理机制。发现(1)降低了T. glabrate胞内NADH水平能加快糖酵解速率,促进丙酮酸合成,降低甘油和乙醇的合成;(2) 调控T. glabrata不同亚细胞结构中NADH水平对TCA循环途径基因转录、蛋白表达量和关键酶酶活性没有显著影响,而主要是通过上调糖酵解途径,下调甘油和乙醇途径中关键基因的转录、蛋白表达和酶活性而促进丙酮酸合成;(3)增加胞内NADH供给,促进T. glabrata对非生宜环境的抵御能力。
英文主题词Torulopsis glabrata,NADH, Regulation, Glycolytic flux, TCA