目前处理霉变饲料的主要方法有物理吸附、化学处理和生物转化等。生物转化法虽出现较晚,但其能对真菌毒素高效灭活、对动物机体没有毒副作用等优点而日益引起重视。已知某些微生物中的环氧化物还原酶和环氧酶以及内酯酶可参与真菌毒素的转化。本课题组已从反刍动物消化道内分离到一种能对单端孢霉烯族毒素高效灭活的细菌,并且通过对其生物性状的研究,其真菌毒素的降解作用是由环氧化物还原酶(epoxide reductase)催化的结果。本研究旨在进一步纯化单端孢霉烯族毒素降解株,从中提取环氧化物还原酶;研究其降解单端孢霉烯族毒素的去毒机理,为生物降解真菌毒素提供理论基础。
以脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)为唯一碳源,从土壤中分离到一株可以生物转化DON的真菌,编号为NJA-1,经β-tubulin 基因序列分析和形态学观察最终鉴定该菌株为塔宾曲霉(Aspergillus tubingensis)。该菌的β-tubulin 基因序列在GenBank的登录号为DQ902579。在pH6,30℃,14d内其对DON的平均转化率为94.4%。通过对DON的转化产物的HPLC-MS分析,结果表明转化产物的分子量为314.4D,与DON的分子量(296.3D)相比增加了18.1D,其机理可能是DON的主要毒性基团12,13-环氧环打开变成了两个羟基,其分子量就成了314.4D。该菌在无机盐中对DON的耐受浓度高为40mg/L。通过对转化产物的鉴定,初步认为在DON的转化中起主要作用的是环氧化物水解酶,并对该酶进行的初步的分离和鉴定。用该菌对饲料中的DON进行了降解试验,结果表明在饲料添加5g kg-1 的NJA-1菌能减少DON引起的毒性作用。同时在饲料中添加5g kg-1的NJA-1菌没有对昆明小鼠造成明显的副作用,为该菌的进一步应用研究奠定了基础。