中文摘要：

肾透明细胞癌（CCRCC）是较常见的成人恶性肿瘤，晚期、转移或复发患者总体疗效并不满意。目前对于CCRCC根治性肾切除后转移和复发风险的情况，迫切需要精确的预后评价指标作为指导。本项目在研究发现VHL抑癌基因作为检测指标存在局限性的基础上，提出综合VEGF、E-cadherin和肿瘤抑制基因（TSGs）的DNA甲基化等多指标检测的新策略，期望对其预后判断最终提供理论及实验依据。通过研究CCRCC和瘤旁组织中VHL联合上述基因甲基化情况与CCRCC的预后指标关系，明确VHL基因表达缺失和甲基化时上述基因的甲基化特征及基因产物表达与CCRCC预后的潜在关系。了解VHL/缺氧诱导因子（HIF）通路上VEGF和E-cadherin的表达与DNA甲基化关系。这为明确肾肿瘤的发病机制，使预后分析更加精确高效，提供可靠灵敏全面的分子生物学指标，具有重要临床研究意义。

结论摘要：

肾透明细胞癌（CCRCC）是较常见的成人恶性肿瘤，晚期、转移或复发患者总体疗效并不满意。综合VEGF、E-cadherin和肿瘤抑制基因（TSGsp15, p16, BRCA1,Rb, E-cadherin）的DNA甲基化等多指标检测的新策略，明确多个基因的甲基化谱式对肾癌的预警作用。同时，选择了722个在多种肿瘤中频繁发生甲基化改变的肿瘤相关编码基因，采用DNA甲基化定量分析芯片分析了肾癌组织细胞中各基因的甲基化状态。应用22个微卫星位点标记物，比较了3p, 4q, 6q, 7q, 8p, 9p, 14q, 17p的LOH，发现3p（VHL,PBRM1, BAP1，SETD2）的LOH频发和 14q（HIF1A）的LOH在肾癌中发生率较高，，与C-RP及一些肾外表现可以作为肿瘤预后的另一个预警手段。针对P53的上游调控基因ASPP1、ASPP2、IASPP的蛋白在110例肾肿瘤及瘤旁组织有差异性表达，ASPP1的IHC结果具有显著的差异性。对ASPP1在肾癌细胞系 （NC65、Caki2、CCF-RC1、CCF-RC2、786-0、ACHN、Caki-1）的表达情况及相关的细胞功能及调控机制进行了研究，应用110例的临床标本的临床信息及预后数据进行了相关性分析。用MTT方法明确7株肾癌细胞系，对四种常用的化疗药物的IC50，应用化疗耐受和敏感的细胞系进行二代测序（RNAseq: mRNA, miRNA, lncRNA, DNA methylation, CNS,SNP），同一样本多水平测序，与TCGA肾癌报告芯片数据及预后数据进行分析比对。本研究探讨了肾透明细胞癌发生的分子机制，并从表观遗传学角度，通过选择有一定代表性的表观遗传修饰基因，分析其生物学意义，阐明在肾癌发生中的作用，为肿瘤预后监测及预警、肿瘤治疗提供一个新的切入点。