基因免疫是近年来发展起来的新型分子生物学技术。本研究采用TSH受体胞外段DNA疫苗及IL-4基因疫苗接种初生Graves病的易感小鼠,诱导对TSH受体的免疫耐受,观察对实验性Graves病的免疫预防作用。本研究将为人类Graves病及其他自身免疫性疾病的预防提供重要的实验依据。本研究首次探索基因免疫诱导免疫耐受来预防自身免疫性疾病。
摘要目的利用分子生物学方法构建促甲状腺激素受休(TSHR)真核表达载体;用表达TSHR的腺病毒免疫BALB/C小鼠诱导甲亢动物模型;用不同剂量表达TSHR的腺病毒对新生期BALB/C小鼠经腹腔注射诱导免疫耐受,抑制甲亢的发生,探索该病的预防途径。方法提取人甲状腺组织总RNA,经逆转录得TSHR膜外区cDNA,经双酶切后克隆入pcDNA3.1(+)表达载体中,并在COS细胞中表达 ,Westernblotting免疫印迹法检测其免疫活性。AdMax法构建重组腺病毒。在0、3周时用不同剂量的TSHR-腺病毒腹腔注射新生期BALB/c小鼠诱导免疫耐受,在8、11、14周时用TSHR-腺病毒肌肉注射诱导甲亢。末次免疫后8周摘眼球取血,检测血清TRAb、TT4、TSH,剥离甲状腺,行组织学检查。结果成功构建TSHR真核表达栽体;成功制备甲亢动物模型;耐受组甲亢的发生明显降低。结论利用表达TSHR的重组腺病毒免疫小鼠可成功抑制其后实验性甲亢的发生。本研究结果将对Graves病的预防和治疗产生重要影响。