白叶枯病作为水稻"三大病害"之一,严重影响水稻的生长发育与生产。水稻抗白叶枯病基因Xa7具有高抗、广谱的抗病特性,比其它抗病基因的抗性更加持久,因此Xa7基因在植物抗病机理研究与水稻育种中都具有重要价值。本申请项目在已将Xa7基因定位于水稻第6染色体上56kb区间内、并确定Xa7候选基因的工作基础上,通过候选基因的转基因功能验证,克隆Xa7基因;分析Xa7基因的启动子序列、组织表达特征与亚细胞定位情况等;研究Xa7与无毒基因avrXa7的互作模式,并利用基因芯片分析Xa7抗病途径的下游基因,初步阐明 Xa7基因的生物学功能及抗病分子机制。本申请项目的研究成果必将丰富植物抗病分子机制的理论知识,同时为水稻抗病分子育种提供新的抗源,也为抗病基因与病原菌互作模式研究增添新的素材。
rice;bacteril blight resistant gene;Xa7;cloning;resistance molecular mechanism
水稻Xa7是一个高抗、广谱、持久的抗白叶枯病基因,在植物抗病机理研究与水稻育种中具有重要价值。课题组在已将Xa7基因定位于水稻第6染色体上56kb内、并预测了一个候选基因的基础上,获得该项目的资助,并在计划期间取得了相应的试验进展。研究表明Xa7候选基因的转基因水稻(除部分株系外)显著性提高了对白叶枯病菌的抗性,证明基因具有一定的抗病功能,但是在Xa7定位区间内仍然存在很多未知序列,也不排除Xa7的抗病性是有两个紧密连锁的基因所共同调控的。因此,通过构建水稻“镇恢084”的基因组文库和测序,获得了这段120kb序列,与日本晴预测的56kb差异非常大,结合RNA-seq和RT-PCR在多个品种中的反复验证,最终明确了两个新的Xa7候选基因,并转化到了水稻中正在植株再生,待综合分析这3个候选基因的功能后,确定Xa7基因。同时,我们还对Xa7的抗病机制进行了探索,生理测定表明Xa7基因的抗病应答中,提高了活性氧代谢酶的活性,增强了细胞对活性氧的清除能力,对细胞起到了更好的保护作用;基因芯片发现了一个基因Os03g0853200,其表达只在含有Xa7的各种水稻品种中受病菌的强烈诱导,推测是Xa7抗病应答中的一个关键调控基因。这些研究结果为Xa7基因抗病分子机理研究奠定了坚实的基础,并获得了一定的成果,发表研究论文4篇,其中SCI两篇,授权专利1项,负责人晋升副教授,培养硕士研究生3名。