中文摘要：

滋养细胞凋亡是导致子痫前期（PE）的重要原因；印迹基因H19是引起滋养细胞凋亡的重要因素；DUSP5在印迹基因H19调控滋养细胞凋亡过程中起着关键的信号传导作用；而且PE时DUSP5表达显著下降。因此,我们认为DUSP5可能参与调控滋养细胞的凋亡过程，从而导致PE的发生发展。本项目拟在前期研究基础上绘制出DUSP5在正常妊娠和PE不同孕期外周血及胎盘滋养细胞的动态变化图谱以及H19印迹状态的动态变化图谱，观察其动态变化规律与PE发生的内在联系，为PE的预测提供新的可行的方法；同时构建DUSP5的过表达腺病毒载体和DUSP5-RNA干扰的慢病毒载体深入探讨DUSP5对滋养细胞生长、增殖、凋亡、侵袭等生物学行为的影响以及明确DUSP5在H19调控滋养细胞凋亡过程中的具体的细胞凋亡途径，为滋养细胞凋亡的调控机制以及PE的发病机制的阐明奠定新的分子理论基础，也为发展新的临床治疗策略提供可行的靶点

结论摘要：

双特异性磷酸酶(dual specificity phosphatases, DUSPs)，又名MAPK磷酸酶（mitogen-activated protein kinase(MAPK)phosphatases, MPK），是一种MAPK的特异性负性调节剂，通过调节MAPK级联反应参与细胞生存代谢过程，调节细胞增殖、凋亡和细胞周期；参与多种肿瘤的发生发展过程。本项目在前期研究基础上绘制出DUSP家族在早孕绒毛组织、正常晚孕胎盘组织及子痫前期胎盘组织中的表达差异图谱，发现DUSP家族各基因在早孕绒毛组织中均高表达，而在正常胎盘组织和子痫前期胎盘组织中的呈低表达。其中DUSP1、DUSP2、DUSP3、DUSP4、DUSP5、DUSP6、DUSP9、DUSP10、DUSP23共9基因在子痫前期胎盘组织中显著减少；而DUSP8、DUSP14及DUSP22在子痫前期胎盘组织中显著增高。同时构建了DUSP5的过表达慢病毒载体和DUSP5-RNA干扰的慢病毒载体，通过感染BeWo细胞，流式细胞仪分选分别建立了过表达DUSP5的BeWo细胞模型以及DUSP5干扰的BeWo细胞模型，荧光实时定量 PCR和Western blot检测DUSP5基因mRNA和蛋白的表达，CCK-8实验和流式细胞术检测BeWo细胞增殖和凋亡的变化，Western blot检测磷酸化ERK(p-ERK)、p-p38及p-JNK的变化。研究结果发现DUSP5过表达抑制细胞凋亡、促进BeWo细胞增殖；DUSP5过表达可下调p-ERK1/2水平，而对MAPK家族中另两条通路p38和JNK信号通路无明显作用。DUSP5低表达可促进BeWo细胞凋亡、抑制BeWo细胞增殖；相反，DUSP5低表达可上调磷酸化ERK1/2，而p38和JNK信号通路无明显作用。进一步研究用ERK1/2抑制剂U0126阻断ERK1/2信号通路后，发现DUSP5低表达引起的BeWo细胞凋亡现象几乎被抑制，提示DUSP5对滋养细胞增殖凋亡的调控作用是通过制ERK信号通路介导的。本研究为滋养细胞凋亡的调控机制以及PE的发病机制的阐明奠定新的分子理论基础,也为发展新的临床治疗策略提供可行的靶点。本课题按计划完成全部内容，已发表SCI论文3篇，中文2篇，培养研究生2名，经费支出30.4万元，结余1.6万元。