随着人类基因组测序工作的完成,生命科学进入了功能基因组和蛋白质组学时代,越来越多的表征机体生理、病理状况的蛋白质生物标志物被发现,为疾病诊断、预后、治疗监测、和药物筛选提供了强有力的研究手段。但常规样品如组织或体液中蛋白标志物的丰度一般都非常低,且尚未找到类似于核酸聚合酶链式反应的蛋白质扩增方法,发展蛋白质超高灵敏检测技术成为生物标志物得以实际应用的基础。本项目拟通过单分子流式检测技术和微珠免疫分析方法的有机结合创建超高灵敏蛋白质免疫化学分析平台。在为期三年的国家自然科学基金执行期间(2007.1-2009.12),我们按计划顺利完成了单分子流式检测仪的研制与改进工作,实现了单个藻红蛋白分子荧光信号的检测,并成功将其应用于DNA片段长度测定、单个纳米颗粒多参数表征、致病菌快速鉴别等领域。采用商品化的微球建立了蛋白质TNF-a的流式微球免疫分析方法,其检测限比传统酶联免疫吸附分析法(ELISA)低6倍。实验室自行合成了粒径均一、羧基密度高、光稳定性好的多功能化荧光编码微球,并将其应用于多种肿瘤标志物的同时检测。总之,三年的研究计划已经达到了预期的研究目标。
英文主题词single molecule detection; nanoparticles; pathogenic bacteria; protein biomarkers;fluorescence-encoded microspheres