中药苦参作用靶点的活细胞内筛选与研究-东篱科研大数据发现系统（DRDS）

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中药苦参作用靶点的活细胞内筛选与研究

项目名称：中药苦参作用靶点的活细胞内筛选与研究
项目类别：青年科学基金项目
批准号：30300449
申请代码：H2811
项目来源：国家自然科学基金
研究期限：2004-01-01-2006-12-31

项目负责人：刘北忠
负责人职称：教授
依托单位：重庆医科大学
批准年度：2003

中文摘要：

本课题拟在前期研究的基础上，以配体与靶蛋白的结合为基础，通过自行建立的一种新的小分子配体酵母三杂交系统，直接在活细胞内筛选与中药苦参多种生物碱有相互作用的靶蛋白。对筛选到的靶蛋白，进一步运用分子生物学、生物信息学等多种技术与方法进行结构与功能的研究，并分析多种靶蛋白之间的相互关联，从分子水平揭示中药苦参作用的分子机制，为中药研究提供全新的技术平台和研发途径。

中文主题词：小分子配体酵母三杂交系统；苦参碱；地塞米松；靶蛋白

英文摘要：

small molecule ligand yeast th

英文主题词： small molecule ligand yeast th

结论摘要：

苦参碱作为中药苦参的主要活性成分，众多研究表明其在体外具有诱导红白血病K562细胞分化的作用，但其确切的作用机制一直未能得以阐明。为揭示其分子作用机制，本课题拟以人工合成的小分子配体作为诱饵，通过自行建立的一种新的小分子配体酵母三杂交系统，直接在活细胞内筛选并研究与苦参碱有相互作用的靶蛋白。通过实验研究，我们已成功地完成了苦参碱与糖皮质激素地塞米松的有机拼合与鉴定，糖皮质激素受体功能域的重组载体pGBKT7-GR的构建、单倍体酵母细胞AH109的转化与表达鉴定，人红白血病cDNA文库重组载体pACT2的构建、单倍体酵母细胞Y187的转化与多样性鉴定和两种单倍体酵母细胞的交配实验研究，从而成功地构建了预期的小分子配体酵母三杂交系统，为苦参碱作用靶蛋白的活细胞内筛选奠定了坚实的实验基础，并在此基础上进行了初步的苦参碱作用靶点的活细胞内筛选与研究，目前研究仍将继续，以期获得明确的实验结果。通过小分子酵母三杂交系统的建立和应用，必将从分子水平揭示苦参碱诱导分化作用的分子机制，促进中药抗白血病的现代化研究，并将为非多肽类的中药研究提供崭新的技术平台和研发途径。

成果综合统计