中文摘要：

本研究针对目前小分子农、兽药残留及有害食品添加剂快速检测研究的热点，着眼于解决传统免疫检测技术中采用的单克隆抗体生产周期长、产量低、成本高等问题，首次以盐酸克伦特罗（CBL）为研究对象，通过噬菌体表面呈现技术构建抗CBL单链抗体库，筛选、鉴定具有高抗原亲和性及特异性的抗CBL scFv基因，采用分子生物学、细胞生物学与生物分离相结合的方法，实现抗CBL scFv在大肠杆菌中的高效表达及分离纯化，并探索其替代单克隆抗体用于酶免疫法分析CBL的可能及效果。研究成果将为免疫检测技术应用于小分子农、兽药及有害食品添加剂残留的快速检测提供一种新途径，与获得自主知识产权有着重要意义。

结论摘要：

本研究针对目前小分子农、兽药残留及有害食品添加剂免疫快速检测研究的热点，首次以盐酸克伦特罗（CBL）为研究对象，利用噬菌体表面呈现技术进行抗CBL噬菌体单链抗体的筛选与表达及其作用研究。研究结果如下1)成功构建抗CBL单链抗体库，筛选并鉴定重组阳性克隆；2)成功在大肠杆菌中表达抗CBL噬菌体单链抗体，重组蛋白分子量为29kDa，竞争ELISA分析表明可溶性单链抗体可被游离的CBL竞争性抑制，IC50值为0.78 ng；3)成功构建高表达载体pBV220-CBL并优化大肠杆菌工程菌发酵条件，表达量达33.7％，分离纯化获具活性的抗CBL单链抗体，纯度>98%,蛋白回收率79％；4)初步建立了抗CBL单链抗体免疫法检测方法，线性分析范围在0.14~10.2 ng/mL，最低检测限0.O6ng/mL；5)进行重组抗体生物信息学的初步研究。预测单链抗体分子量为25826.6，等电点为8.78。研究成果为免疫检测技术应用于小分子农、兽药及有害食品添加剂残留的快速检测提供了一种抗体获得的新途径，也为进一步将分子生物学技术用于食品中小分子有害物的免疫快速检测研究奠定了良好的基础。