基于核糖体展示的链格孢毒素抗独特型抗体制备及其无毒免疫分析特性研究-东篱科研大数据发现系统（DRDS）

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基于核糖体展示的链格孢毒素抗独特型抗体制备及其无毒免疫分析特性研究

项目名称：基于核糖体展示的链格孢毒素抗独特型抗体制备及其无毒免疫分析特性研究
项目类别：面上项目
批准号：30871755
申请代码：C200103
项目来源：国家自然科学基金
研究期限：2009-01-01-2011-12-31

项目负责人：王弘
负责人职称：教授
依托单位：华南农业大学
批准年度：2008

中文摘要：

本项目重点以链格孢毒素中毒性最大的细交链孢菌酮酸(Tenuazonic acid，TeA)为研究对象，利用核糖体展示技术构建抗TeAH核糖体展示单链抗体库，筛选、鉴定特异性单链抗体基因，通过表达载体构建，表达重组抗体，进而用于抗独特型抗体制备，并初步建立了基于重组抗体及抗独特型抗体的TeA免疫分析方法。研究结果表明，1）合成TeA人工抗原免疫小鼠后，血清效价为1:128000，对TeAH半抑制浓度（IC50）为78.33 ng/mL；2）构建抗TeAH核糖体展示单链抗体库，库容达1.85×1012，经富集筛选获得阳性克隆，经表达重组单链抗体-AP融合蛋白分子量约75 kDa，效价1:64，IC50为8.46 ng/mL，LOD为1.03 ng/mL，线性范围为1.44-75.29 ng/mL；3）经核糖体展示筛选获得的抗TeAH独特型抗体效价为1:64；添加药物对重组抗独特型抗体白的竞争结合中浓度BC50为0.103ug/mL；4）初步建立了无毒免疫分析方法，LOD为19.3ng/ mL、线性范围25.8 ng/ mL-0.534ug/ mL，BC50为81.7 ng/ mL。

中文主题词：核糖体展示；细交链孢菌酮酸；单链抗体；抗独特型抗体；免疫分析

结论摘要：

英文主题词ribosome display；tenuazonic acid；scFv； anti-idotype antibody；immunoassay

成果综合统计