中文摘要：

我们前期"十一五"国家科技支撑重大疑难疾病项目多中心随机对照临床研究发现中药清热止血方联合中成药雷公藤多苷（GTW）对儿童血尿伴蛋白尿型HSPN降蛋白效果明显优于西药对照组。中药降蛋白疗效好的机理是什么？清热止血方、GTW的作用孰轻孰重？或是协同作用？目前，中药及GTW干预HSPN肾小球足细胞损伤及系膜细胞-足细胞轴的研究未见报道，故探索中药治疗HSPN在系膜细胞－足细胞轴水平的疗效机制是中医儿科领域的前沿课题。本项目拟通过清热止血方、GTW、强的松联合肝素、清热止血方联合GTW四种不同治疗方案干预体外培养HSPN系膜细胞、足细胞损伤模型。观察系膜细胞、足细胞形态变化；系膜细胞增殖情况；系膜细胞、足细胞TNF-α分泌情况；足细胞裂孔膜podocin、nephrin和顶膜端Podocalyxin表达分布、蛋白和核酸表达量变化；以阐明清热止血方、GTW快速降低HSPN患儿蛋白尿的疗效机制。

结论摘要：

紫癜性肾炎(Henoch-Sch？nlein purpura nephritis，HSPN)是儿童最常见的继发性肾小球疾病。蛋白尿是HSPN肾损伤进行性加重的关键原因。我们前期“十一五”国家科技支撑重大疑难疾病研究发现清热止血方联合雷公藤多苷（Tripterygium glycosides，GTW）对儿童血尿伴蛋白尿型HSPN降蛋白效果优于西药对照组。中药降蛋白疗效好的机理是什么？清热止血方、GTW的作用孰轻孰重？肾小球足细胞损伤是蛋白尿产生的主要原因，故探索中药治疗HSPN在肾小球系膜－足细胞轴水平的疗效机制是本研究的主要目标。本课题成功提取HSPN患儿和健康儿童血清单体IgA1(mIgA1)并热聚合成聚合体IgA1（aIgA1)，通过超微量分光光度计检测分离纯化的各样品多pIgA1和mIgA1的浓度，发现HSPN患儿血清mIgA1和pIgA1均较健康对照患儿明显增高,说明IgA1的异常增高与HSPN发病有关。 本课题成功制备HSPN肾小球系膜细胞、足细胞损伤模型，结果显示HSPN患儿血清IgA1不能直接造成足细胞损伤，而HSPN患儿血清IgA1与系膜细胞共培养的上清液可造成足细胞结构蛋白表达减少并分泌炎症介质，提示HSPN足细胞损伤的原因源自异常增高的血清IgA1-系膜细胞-炎症介质轴。 药物干预系膜细胞损伤模型结果显示GTW+清热止血法能显著抑制系膜细胞增生；GTW+清热止血方、强的松+肝素、清热止血方均能抑制系膜细胞释放炎症介质，但GTW+清热止血方起效快、作用强、起效过程以GTW为主。药物干预足细胞损伤模型结果显示GTW+清热止血方、GTW、强的松+肝素、清热止血方均能抑制足细胞释放炎症介质，但GTW+清热止血方和强的松+肝素较清热止血方起效快；GTW在保护裂孔膜分子Nephrin方面优于强的松+肝素；强的松+肝素在保护裂孔膜分子Podocin方面略优于单用雷公藤，GTW+清热止血方在保护Podocin方面可起到协同作用。本项目研究完成了预定计划，其创新在于 1. 首次发现HSPN患儿血清mIgA1和pIgA1较健康对照患儿明显增高,HSPN足细胞损伤的原因源自异常增高的血清IgA1-系膜细胞-炎症介质轴。 2. 阐明中药GTW和清热止血方治疗HSPN中的疗效机制除显著抑制系膜细胞增生外，与保护足细胞裂孔膜分子Nephrin有关。