中文摘要：

间变性淋巴瘤激酶（ALK）是一种受体酪氨酸激酶，正常情况下只表达于新生儿的神经系统。基因异位导致ALK的胞内激酶区和其他基因5'端融合，启动了ALK融合基因的表达，激活了ALK的活性，在多种肿瘤发挥癌基因作用。ALK小分子抑制剂对部分肺癌和炎性肌纤维母细胞瘤的显著疗效表明，ALK是一种有效的治疗靶点。食管癌中也发现了ALK融合蛋白的表达，是潜在的靶向治疗位点。本研究将在300例食管鳞癌组织中检测ALK高表达率，并确定ALK融合基因的类型，分析ALK高表达对食管鳞癌细胞活性的影响。在此基础上，检测已发现的5种有活性ALK小分子抑制剂对高表达ALK的食管鳞癌细胞的生长抑制作用，确定其中有效的靶向药物。进一步在原代食管鳞癌裸鼠移植模型中验证ALK靶向药物的治疗效果，为进行临床试验奠定基础。本研究有效结合了国际研究热点和我国特发肿瘤，对发现食管鳞癌的治疗靶点，寻找有效的靶向治疗药物具有重要意义。

结论摘要：

间变性淋巴瘤激酶（ALK）是一种受体酪氨酸激酶，正常情况下只表达于新生儿的神经系统。基因重排导致ALK的胞内激酶区和其他基因5'端融合，激活了ALK基因的表达和活性，在多种肿中发挥癌基因作用。ALK小分子抑制剂对部分肺癌和炎性肌纤维母细胞瘤的显著疗效表明，ALK是一个有效的治疗靶点。蛋白质组学研究报道了食管鳞癌中的ALK融合蛋白的表达，提示ALK是食管鳞癌潜在的靶向治疗位点。本研究原计划在约300例食管鳞癌组织中检测ALK表达水平，并确定ALK融合基因的类型，分析ALK高表达对食管鳞癌细胞活性的影响。在此基础上，检测已发现的5种有活性ALK小分子抑制剂对高表达ALK的食管鳞癌细胞的生长抑制作用。课题实施后，我们首先利用免疫组化法检测了370食管鳞癌石蜡组织中ALK表达水平，利用FISH法检测了300例石蜡组织中ALK基因，结果均未发现ALK在食管鳞癌组织中存在融合或高表达。我们的119例食管鳞癌全外显子组测序数据也未发现ALK基因融合。这表明食管鳞癌中存在ALK融合基因的可能性很小，不适合作为药物靶点进行后续研究。随后，我们利用二代测序技术，对15例食管鳞癌组织和3个食管鳞癌细胞系进行了RNA序列分析，分析共发现了163个融合基因，并发现了WDR34-SET是食管鳞癌中频发的融合基因。为研究针对融合基因进行食管鳞癌靶向治疗提供了重要依据。我们还针对癌症中新发现的治疗靶点EZH2，检测了8种EZH2小分子抑制剂对食管鳞癌细胞增殖的抑制活性。发现了EZH2小分子抑制剂UNC1999对食管鳞癌细胞具有较强的抑制活性，为后续开展深入药效研究提供基础。