中文摘要：

脂肪沉积在转录和表达水平上受多种转录因子调控，其中miRNA是近些年发现的调控方式，miRNA通过作用于靶基因，改变靶基因的转录或表达水平起作用。miR-378和miR-143是与肉牛脂肪沉积相关的miRNAs，但其对肉牛脂肪沉积的调控机理还需进一步研究。针对我国肉牛肌间脂肪含量少、分布不均匀的缺陷，以肉牛脂肪细胞及组织为材料，采用生物信息学、荧光素酶标记、实时定量PCR和免疫印记等方法揭示miR-378和miR-143的靶基因在牛脂肪细胞及组织中的表达规律；在此基础上将miR-378和miR-143分别转染牛脂肪细胞，采用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测细胞形态及周期的变化；以MTT法和细胞迁移试验检测细胞增殖和迁移能力；初步探明miR-378和miR-143对牛脂肪沉积的调控机理，为进一步揭示miRNA调控牛脂肪沉积提供新的途径，为通过现代生物技术培育肉牛新品种奠定分子生物学基础。

结论摘要：

项目围绕miR-378和miR-143对牛脂肪沉积的调控，开展了一系列的研究工作。研究发现了miR-378，miR-143和miR-145在组织中的表达规律和在牛前体脂肪细胞分化过程中的表达规律。miR-143与脂代谢相关的靶基因是MAP2k5和TGFB2，miR-378的潜在靶基因是CaMKK2。成功获得miR-378、miR-143过表达及干扰细胞株，检测了脂肪代谢相关基因在各细胞株中的表达情况，正在进行目标靶基因mRNA及蛋白水平的检测。并检测了miR-378和miR-143对牛脂肪细胞学方面的影响。