雌激素受体(ESR)为典型的核转录因子,一旦与雌激素结合,就会刺激靶基因转录,进而调节雌激素促进细胞维持正常的生理功能。而ESR基因转录过程中产生的嵌合mRNA是基因表达多样性的重要表现形式,从而使ESR基因的嵌合mRNA对雌激素的转录调控起到重要作用。因而选择与牛繁殖性能密切相关的ESR基因作为研究对象,研究其嵌合mRNA的功能作用对深入了解牛等家畜的繁殖调控机制具有重要的现实意义。为此,本项目在前期研究基础上,拟利用生物信息学和分子生物学等技术从牛的不同组织细胞中检测与ESR关联的嵌合mRNA,并通过其嵌合转录子表达载体的构建,转染到牛体细胞内,从细胞模型和动物模型两方面研究ESR嵌合mRNA的功能作用。通过以上研究,以期明确牛ESR嵌合mRNA形成的分子机制,以及阐明ESR嵌合mRNA对其相关基因的转录调控作用,这将有助于我们进一步了解ESR基因对雌性动物繁殖性能影响的具体机制。
Estrogen receptor;Follicle stimulating hormone receptor;Chimeric RNA;Cattle;
通过项目的实施,已经进行了牛EST数据库相关数据的生物信息学分析,找到了9811个嵌合EST序列;对生物信息学分析获得的结果,结合ESR基因和FSHR基因的序列,找出了一些与ESR1基因或FSHR基因嵌合的EST序列;通过RT-PCR技术在牛组织细胞中检测了这些与ESR1基因或FSHR基因嵌合EST的表达情况,并利用RACE方法克隆了其中1个嵌合EST的全长cDNA序列,以及通过其表达载体的构建和细胞转染,初步从细胞模型上了解其生物学功能的作用。目前,项目已经发表论文3篇。