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重组水通道蛋白在模拟生物膜中的整合及其功能重建
  • 项目名称:重组水通道蛋白在模拟生物膜中的整合及其功能重建
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:20876140
  • 申请代码:B060801
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2009-01-01-2011-12-31
  • 项目负责人:蔡谨
  • 负责人职称:副教授
  • 依托单位:浙江大学
  • 批准年度:2008
中文摘要:

水通道蛋白具有高效的水透过性和高度专一性,有望形成以水通道蛋白为基础的新型水过滤系统。在无细胞体系实现AqpZ 的高效和可溶性表达。在Brij78条件下,得到530 mg/l 可溶性AqpZ。在无细胞体系中添加DOPC脂质体,发现AqpZ自动定位到脂质体的磷脂层。AqpZ可溶表达水平最高可达470 mg/l。信号肽对 AqpZ 表达有显著的促进作用。与MBP等融合表达,可降低胞内表达引起的细胞毒性。经酶切和亲和层析可得到高纯度AqpZ。对新型水通道蛋白Aqp SS9进行了克隆表达和性能研究。在固体支撑膜的制备方面,以聚二甲基硅油(PDMS)磺酸酯为引发剂进行2-甲基-2-噁唑啉阳离子开环聚合,合成了分子量约为9680 g/mol、多分散系数为1.6 的双亲性ABA型三嵌段共聚物聚甲基噁唑啉- 聚二甲基硅油- 聚甲基噁唑啉(PMOXA24-PDMS74-PMOXA24),并通过融合法使其在高亲水性的云母、硅片表面沉积形成固体支撑膜。利用多孔硅和纳米孔氧化铝作基底制备了支撑磷脂膜。同时,为进一步进行水通道蛋白的整合,研究了AqpZ与磷脂DOPC和聚合物间的相互作用及离子条件对其的影响。

结论摘要:

英文主题词Aquaporin;soluble expression;cell-free system;biomimetic membrane


成果综合统计
成果类型
数量
  • 期刊论文
  • 会议论文
  • 专利
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  • 著作
  • 11
  • 2
  • 0
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