中文摘要：

了解分娩启动的机制，对于正确处理产程，防治早产及过期产具有重要的指导作用。但是分娩启动机制的具体分子机制至今仍未完全阐明。本项目基于"功能性的孕激素撤退"是分娩发动关键因素的理论，结合我室近期发现分娩启动后存在PR启动子区甲基化状态变化的现象。提出孕激素受体启动子区甲基化/乙酰化修饰是参与"功能性孕激素"撤退的重要分子机制。拟通过MSP、BSP及ChIP技术对比分娩启动前后PRB启动子区甲基化/乙酰化水平；对比HDAC、TSA与ADC处理子宫平滑肌细胞前后PRB表达及其启动子区甲基化/乙酰化水平变化，初步探讨甲基化/乙酰化修饰是否与"功能性孕激素"撤退介导的分娩启动机制相关。为探索控制分娩启动的有效环节，防治早产及过期产提供新理论依据。

结论摘要：

分娩启动的具体分子机制至今尚未阐明。目前认为功能性的孕激素撤退是分娩发动的关键因素。根据前期研究结果，课题组认为孕激素受体启动子区甲基化/组蛋白乙酰化修饰是参与“功能性孕激素”撤退的重要分子机制。本课题基本按照原计划开展实施，由于实验干扰因素众多，目前大部分完成实验内容，仍有部分实验结果不满意，正在重复实验以得到满意结论。 课题组采用酶消化法，成功建立原代子宫平滑肌细胞体外培养体系，经过免疫荧光鉴定得以证实，并实现稳定传代。课题组证实了临产后子宫平滑肌组织PR，PRA和PRB的表达均增加，但PRB/PR的比例却显著低于临产前，相反，PRA/PRB的比例却高于临产前，提示PR亚型比例的变化是参与孕激素功能性撤退的重要分子机制。此后，重点研究了表观遗传学参与孕激素受体亚型比例变化的机制。课题组首先检测临产前后PR启动区甲基化水平的变化情况，采用MSP和BSP方法扩增引物并对之进行克隆测序，结果发现临产后PRA和PRB启动区甲基化水平均下降，相比较于PRA而言，PRB下降更为明显，但临产前后未见统计学差别（P＞0.05）。课题组继续研究PRA和PRB启动区组蛋白乙酰化表达，并在子宫平滑肌细胞体外培养体系中加入HDAC和TSA后，检测组蛋白乙酰化变化情况。参照相关文献，以及已具备的实验基础，拟将和PR启动子激活或抑制相关的位点，包括组蛋白H3/H4，H3K4，H3K9，H3K27等均采用CHIP技术检测其乙酰化及超甲基化。但是由于PRA/PRB表达水平，原代平滑肌细胞体外培养体系加入HDAC和TSA后的生长速度，引物设计等众多影响因素，实验效果不明显，当前正在重复实验，以期得到满意而真实的实验结果。