中文摘要：

病毒受体是公认的引发病毒感染宿主细胞的主要因素，也是影响病毒宿主特异性和组织亲嗜性的决定因素之一。研究病毒受体的特性及其功能对于揭示病毒感染与免疫的机制，为病毒感染性疾病提供更好的诊、防、治方法，深入理解病毒与宿主细胞的相互作用，都具有重大的理论与实践意义。有研究证据显示日本脑炎病毒受体（JEVR）是一种膜蛋白，但迄今未能分离。我室已用ICR-191随机突变病毒易感细胞系BHK-21，获得了13株可耐受病毒攻击的突变细胞系，并拟通过人脑cDNA文库转染这些JEVR功能缺陷细胞以期重建病毒细胞受体蛋白的表达，筛选出病毒受体表达阳性细胞并最终扩增出可能的JEVR基因片段，最后对得到的基因片段进行相关生物学功能的鉴定，包括搞清JEVR基因结构特点、预测受体蛋白可能的结构，为最终阐明日本脑炎病毒感染的分子机制奠定扎实的研究基础，同时也为其他病毒受体研究探索出一条新的技术路径。

结论摘要：

日本脑炎病毒受体（JEVR）迄今未能明确。我们用两种策略对JEVR进行了研究1. 化学诱变剂随机突变BHK-21细胞，经病毒感染、克隆化获得了耐受JEV感染的突变细胞系。其中一个1H8经病毒感染、免疫荧光、流式细胞术等证实其病毒感染能力明显下降，RT-PCR未测到病毒在胞内复制，但始终有个别细胞出现细胞病变。鉴此，改用二维电泳分析正常BHK-21和1H8的差异蛋白，选择差异点进行质谱分析，结果显示为phosphoglycerate mutase 1、annexin A1等，它们和JEVR表达的关系尚未明确。2. 从易感细胞膜蛋白提取物中筛选可与病毒结合的分子。C6/36和BHK-21培养后收集，提取细胞膜蛋白行免疫共沉淀和SDS-PAGE，阳性条带做质谱分析。结果显示阳性条带与热休克蛋白同源物70（HSC70）同源，BHK-21细胞则提示与Laminin和Tubulin有关。用抗HSC70抗体行Western blot，结果显示阳性；激光共聚焦实验也显示HSC70和JEV共同定位于C6/36细胞膜。以上结果提示HSC70可能是C6/36细胞上JEV受体或是受体复合物的一部分。