中文摘要：

肿瘤细胞的多药耐药性是造成化疗失败的主要原因，极大地限制了临床化疗的开展。MDR的发生机制虽有很多，总结起来不外乎是肿瘤细胞内各种耐药相关转运蛋白和酶类的量发生了改变。各种耐药相关蛋白的表达和相互作用是肿瘤发生多药耐药现象的直接基础，但是其确切的作用机制尚不清楚。本研究从肿瘤耐药细胞蛋白质组学的角度出发，选用本课题组前期发现的一种新的羟基喜树碱耐药相关蛋白（hydroxycamptothecin resistant protein,HRP）作为研究对象，利用活细胞内蛋白质与蛋白质之间的相互作用现象，采用cDNA文库构建、酵母双杂交等方法作为主要研究手段，寻找可能与HRP蛋白相互作用的蛋白质及其作用方式，探讨人结肠癌羟基喜树碱耐药过程中HRP蛋白所起的作用，试图进一步阐明肿瘤细胞多药耐药现象的发生机制，并为逆转耐药靶位点的选择做些探索性的工作。

结论摘要：

蛋白质双向电泳分离后发现相比对照细胞SW1116，9个蛋白质点在SWll16/HCPT细胞中表达量发生改变，其中4个蛋白质点表达量增加，5个蛋白质点表达量减少。质谱鉴定了6个蛋白质点分别为琥珀酸脱氢酶复合物(亚单位A)、3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、泛素融合降解 1相似蛋白、胞核氯离子通道蛋白、微管蛋白和ORF蛋白。本课题选取泛素融合降解1相似蛋白深入研究了其在人结肠癌羟基喜树碱耐药过程的作用，构建了针对于UFD1L的siRNA，转染至耐药细胞株中发现UFD1L表达降低后对羟基喜树碱的敏感性增加(IC50下降75%)。成功构建了结肠癌羟基喜树碱耐药细胞株SW1116/HCPT酵母双杂交cDNA文库，同时针对于ORF基因编码的SAKS1构建了酵母双杂交诱饵蛋白SAKS1融合质粒构建，并进行了初步鉴定。