中文摘要：

大肠癌是最常见的恶性肿瘤之一，在国内外都有较高的发病率。Survivin（Sur）是目前已知的最强的凋亡抑制因子，作用机制复杂，需要从整体水平深入探讨。本研究主要应用RNAi技术，沉默Sur基因的表达，分析结肠癌细胞生物学特性的变化；提取RNAi前后的细胞总蛋白，采用蛋白质组学技术研究Sur调控下的差异蛋白变化，寻找功能相关的蛋白质。结果发现在结肠癌临床组织标本和细胞株中Sur表达率高，以细胞质表达为主。本研究将针对人Sur的shRNA的基因序列克隆至肿瘤增殖型腺病毒中，该腺病毒对结肠癌细胞的转染效率较高。沉默Sur基因后细胞凋亡率提高； G1/S期细胞增多和G2/M期降低；细胞侵袭能力降低；体内外肿瘤细胞的增殖能力减弱，提示Sur在细胞质中可参与调控肿瘤多种通路。液氮冻融，RNase、DNase酶解、超声裂解、250ug上样量及70000Vh聚焦等处理后，成功建立了分辨率及重复性较好的双向电泳图谱。经质谱分析有36种差异蛋白质被发现，差异蛋白质存在于多种细胞器，参与多种通路的调控，具有凋亡、周期、细胞代谢及侵袭等不同功能。对Caspase-10及CDK9进行表达验证。