本项目要获得绵羊褪黑激素受体基因(MTNR1A和MTNR1B)的核苷酸序列;分析褪黑激素受体基因的PCR-SSCP和PCR-RFLP多态性;检查褪黑激素受体基因核苷酸序列在常年发情的绵羊品种(小尾寒羊、湖羊)和季节性发情的绵羊品种(特克塞尔、多赛特、萨福克)中的差异,初步阐明小尾寒羊常年发情的分子遗传机理;采用荧光原位杂交方法进行绵羊MTNR1B基因的染色体定位;分析褪黑激素受体基因座位与小尾寒羊高产羔数之间的关系;分析人、猪、鸡、牛、绵羊、山羊、小鼠、大鼠、仓鼠之间的同源性,推断褪黑激素受体基因进化的保守性。本研究成果可为从遗传上控制羊的发情提供理论依据,为通过基因敲除等手段改变羊发情季节性、提高繁殖性能奠定基础。
褪黑激素受体1A(MTNR1A)基因外显子2的605位碱基处表现出MnlⅠ酶切多态性MM(236bp/236bp)、Mm(236bp/303bp)、mm(303bp/303bp);常年发情的绵羊品种MM基因型频率明显高于季节性发情的绵羊品种,mm基因型频率明显低于季节性发情的绵羊品种。MTNR1A基因外显子2的604位碱基处表现出RsaⅠ酶切多态性RR(267bp/267bp)、Rr(267bp/290bp)、rr(290bp/290bp);常年发情的绵羊品种RR基因型频率明显高于季节性发情的绵羊品种,rr基因型频率明显低于季节性发情的绵羊品种。MM和RR基因型与绵羊常年发情相关联,mm和rr基因型与绵羊季节性发情相关联。褪黑激素受体1b(MTNR1B)基因外显子2在常年发情和季节性发情绵羊品种中存在33个碱基突变,这些突变均与绵羊发情季节性相关不大,MTNR1B基因可能不是影响绵羊发情季节性的主要基因。绵羊褪黑激素受体1b在第3跨膜区后具有DRY和CYVCR序列,这与牛的褪黑激素受体1b一致,而不同于已知的其他褪黑激素受体家族中的NRY和CYICH结构。