中文摘要：

本项目通过在体、离体Langendorff灌流和细胞水平实验，采用激光共聚焦、膜片钳、western blot 免疫共沉淀等技术研究M3受体的分子生物学特性探索M3受体信号转导途径的上游机制和下游信号瀑布并筛选调节M3受体的信号因子。本项目在国内外首次发现1）原代培养乳鼠心室肌细胞存在高丰度M3受体表达，介导ERK通路。2）M3与β-catenin在心肌细胞闰盘处存在结构性共定位关系并且在病理状态下调节β-catenin的表达而调节心肌闰盘病理性重构；3）M3参与调节PKC-ε的转位活化，PKC-ε活化能够调节M3磷酸化水平即调节M3功能状态；4）激活M3受体诱导晚期缺血预适应，介导Ach的预适应保护作用，减少缺血所致心律失常的发生率和严重程度并缩小缺血再灌注所致的心肌梗死面积。5）激活M3能够降低药物升高的细胞内钙，恢复缺血所致的Cx43的去磷酸化从而恢复心肌细胞偶联，进而抗心律失常；激活M3上调HSP70和COX-2减少缺血再灌导致心肌损伤。本研究证实毒蕈碱受体新亚型M3及其介导的信号通路具有很好的心肌保护作用是潜在的调节心肌重构和抗心肌缺血性损伤的靶点。