中文摘要：

EB病毒潜伏性膜蛋白1（LMP1）作为病毒唯一的瘤蛋白能活化多条信号通路而导致细胞的恶性转化，但涉及一些复杂而精细的信号网络机制尚不十分清楚.本研究一方面将构建的CTAR1,CTAR2,CTAR3 3个功能区突变的LMP1与野生型LMP1分别导入永生化的鼻咽上皮细胞（NP69），建立稳定表达并具有表型改变的各转化细胞系，采用双向凝胶技术结合质谱和生物信息学技术分离和识别LMP1各功能区所介导的蛋白信号分子及分子间的相互作用；另一方面将磷酸酶抑制剂Calyculin处理的野生型LMP1(含对照)即时转染的NP69细胞采用磷酸化蛋白质富集（免疫沉淀）结合SDS-PAGE和质谱技术分离和识别LMP1介导发生丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸磷酸化的蛋白质种类及信号途径。不仅能首次从蛋白质水平全方位展示LMP1作用的靶蛋白，而且为进一步阐述LMP1在细胞信号传导中的作用和机制提供新的、更完整的证据。

结论摘要：

EB病毒不仅与BL、HK等淋巴细胞源性恶性肿瘤，而且与鼻咽癌、乳腺癌等上皮源性恶性肿瘤发病密切相关。EB病毒潜伏性膜蛋白（EBV-LMP1）作为病毒唯一瘤蛋白，能通过其3个羧基末端活化区（CTAR）激活多条信号通路而致细胞恶性转化，但涉及某些复杂精细的信号网络尚不清楚。本研究将CTAR1、CTAR2、CTAR3 3个功能区突变的LMP1与野生型LMP1分别导入正常鼻咽上皮细胞（NP69）,建立起稳定表达并呈不同恶性表型的转化细胞系；在此基础上，分别采用蛋白质组学、磷酸蛋白质组学技术分离、鉴定了野生型LMP1与对照组及各突变LMP1组之间的59个差异蛋白和44个差异磷酸化蛋白；通过生物信息学方法对这些差异蛋白进行了功能分类和亚细胞定位；对其中部分差异蛋白进行验证；进而确定了一些与LMP1各活性位点相互作用的功能蛋白。这些研究不仅进一步阐述了LMP1在鼻咽癌发生发展中的作用，而且首次建立起以LMP1信号传导途径为核心的蛋白质相互作用分子网络图谱和数据库，为阐述EBV相关恶性肿瘤发生发展的分子机制提供了重要依据。该研究已完成学术论文8篇，参加国际学术会议2人次，培养研究生3名。