鸡精原干细胞移植的研究-东篱科研大数据发现系统（DRDS）

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鸡精原干细胞移植的研究

项目名称：鸡精原干细胞移植的研究
项目类别：面上项目
批准号：30371031
申请代码：C170104
项目来源：国家自然科学基金
研究期限：2004-01-01-2006-12-31

项目负责人：李碧春
负责人职称：教授
依托单位：扬州大学
批准年度：2003

中文摘要：

本项目研究的目的在于拟将进行鸡精原干细胞的鉴定、移植、分离纯化、体外培养传代，检测其培养后的遗传稳定性和体内外分化特性，转染外源基因的效率等方面的研究，争取在重要技术环节上有自己的创新。将填补国内外利用体外培养精原干细胞进行禽类转基因研究的空白。为弄清鸡生精细胞发展的时程问题提供重要的参考依据。

中文主题词：鸡；精原干细胞；体外培养；诱导分化；转基因鸡

英文摘要：

Chicken；SSCs；induction differe

英文主题词： Chicken；SSCs；induction differe

结论摘要：

① 混合睾丸获得平均94.4%活细胞，每睾平均3.24×105，SSCs纯度高达82.0%。② SSCs在有饲养层时存活长达45d，无饲养层时存活仅为3.5d。③SSCs培养条件和细胞因子最佳剂量是DMEM+10%的胎牛血清+2%的鸡血清+2 mmol/L L-谷氨酰胺+1 mmol/L丙酮酸钠+5.5×10-5mol/L β-巯基乙醇+15ng/mL hSCF+10/mL mLIF+15ng/mL bFGF。④SSCs在10％DMSO冷冻保护下，存活率达到88.6％。⑤特异组合化学物可将SSCs诱导为成骨细胞和神经元样细胞。⑥白消安对公鸡SSCs消生长的最佳时期为20d。⑦电穿孔法体外SSCs转染EGFP，转染率达19.70%；筛选后移植入无内源性SSCs公鸡睾丸中，25后检测显示曲细精管中生精细胞携带有EGFP，精子密度和荧光表达率分别为104个/ml、4.68%。⑧体内SSCs转染EGFP，接受剂量为200μg的公鸡，转染后70d~160d，精子荧光表达率达19.1%。受精胚表达率为73.08%。后代活鸡表达率为50.00%~66.67%；PCR阳性率为55.57%~69.23%

成果综合统计