精原干细胞是成体内唯一终生增殖分化并向子代传递基因的干细胞。因此,它是研究动物细胞发育分化及基因组修饰、操作的最佳细胞模型之一。目前生殖细胞转基因研究主要是体内转染。由于支持细胞及已分化生精细胞的屏障作用,目的DNA难以整合人干细胞基因组内,因此难以持续获得大量转基因生殖细胞。本题拟构建人t-PA基因与标记基因GFP或LacZ的融合基因,利用病毒毒载体感染或脂质体转染等方法,将目的基因导入体外培养精原干细胞基因组中,建立精原干细胞体外转基因的最佳条件和方法,为下一步用于细胞移植技术获得转基因动物奠定基础。
英文主题词mouse; spermatogonial stem cells; in vitro culture; gene transfer; retroviral vector