中文摘要：

抗原识别异常和免疫耐受丧失导致肠黏膜过激的Th1型免疫反应是克罗恩病（CD）发病的核心机制。树突状细胞（DC）TLR-NF-κB信号通路的异常可诱导Th细胞向Th1过度分化，在CD肠黏膜免疫耐受缺失中起到重要作用。本课题组研究发现雷公藤甲素能抑制CD模型小鼠肠黏膜Th1型免疫反应、有效缓解肠炎症，推测可能与雷公藤甲素干预DC的TLR信号通路有关。在前期研究基础上，本研究以肠固有层DC不同亚型TLR及其信号通路为研究对象，结合离体和在体实验，运用免疫荧光标记、分子生物学等技术，从DC表型、不同亚型TLR表达和TLR信号通路变化方面，揭示基于DC的TLR信号通路改变在CD肠黏膜免疫耐受缺失中的机制，并通过观察雷公藤甲素对TLR信号通路的调控作用明确雷公藤甲素对DC的TLR信号通路作用的重要环节和关键位点，阐明雷公藤甲素治疗CD的分子机理，为阐释CD病理生理和临床应用雷公藤治疗CD奠定理论基础。

结论摘要：

肠黏膜免疫耐受缺失是克罗恩病（CD）发病的重要机制。树突状细胞（DC）通过TLR识别病原体相关分子模式，可通过TLR—NF-κB通路促进炎性因子释放，诱导Th细胞分化，在肠黏膜免疫耐受缺失中起重要作用，但基于DC的TLR信号在CD病理生理中的作用尚不明了。本研究在取得雷公藤甲素能抑制多种Th1型细胞因子表达、有效缓解CD模型小鼠肠组织炎症基础之上，以肠固有层DC不同亚型TLR及其信号通路为研究对象，结合离体和在体实验，运用免疫荧光标记、分子生物学和分子免疫学技术，在DC表型变化、不同亚型TLR表达、TLR信号通路、不同炎症因子产生的层面上，揭示CD时DC表型和不同TLR亚型表达变化，阐明基于DC的TLR信号通路改变在肠黏膜免疫耐受缺失中的机制，明确雷公藤甲素对DC的TLR信号通路作用的重要环节和关键位点，并深入研究雷公藤甲素对CD肠粘膜系统IL-6/STAT3信号通路的影响。本课题研究结果表明CD模型小鼠肠固有层TLR2、TLR4、TLR5和TLR9亚型的表达显著增强，提示在CD状态下，TLR信号通路出现异常活化，腹腔注射雷公藤甲素显著的降低肠粘膜TLR2、TLR4、TLR5和TLR9亚型的表达。CD时固有层DC的MHC-Ⅱ、CD86、CD40的表达显著增加，雷公藤甲素干预能够显著的抑制MHC-Ⅱ、CD86、CD40的表达，减少固有层成熟DC的数量。研究还发现，DC细胞内TLR信号通路的重要因子MyD88及NFκB的表达明显增加，而运用雷公藤甲素干预能够显著抑制上述因子的表达、降低TLR信号通路的活化。CD患者固有层DC细胞 MyD88依赖通路TRAM/TRIF的表达显著增加，而Tollip和SIGIRR的表达显著减少，雷公藤甲素干预能够显著降低TRAM/TRIF的表达。本课题研究结果揭示了雷公藤甲素治疗CD的分子机理，为阐释CD病理生理和雷公藤多甙治疗CD奠定理论基础。