中文摘要：

第二代杀虫蛋白Vip3Aa 具有广谱杀虫活性，尤其对一些Cry 蛋白不敏感的夜蛾类害虫（如甜菜夜蛾）有特效，具有独特的杀虫机理。在国家基金的资助下，我们对Vip3A结构和功能之间的关系作了一些探讨。本研究首次发现1）应用定点突变技术发现位于糖结合域570、620和660位的氨基酸残基是该结合域的关键功能位点，而555和616等位点的突变对Vip3A的影响不大。2)结合软件分析和定点突变研究，证实292 和401位的半胱氨酸会形成二硫键, 而292 和507 位的半胱氨酸以及401 和507 位的半胱氨酸不会形成二硫键；并且二硫键的存在与否对Vip3Aa18 至关重要。3）通过缺失突变研究发现，N端的缺失不影响Vip3A的结合能力，仅含糖结合域的片段仍然能与甜菜夜蛾BBMV以及sf9细胞的结合,表明糖结合域的功能与结合受体密切相关。4）应用缺口末端标记法（TUNEL）发现，Vip3A能够引起sf9细胞发现细胞凋亡现象。本项目为进一步揭示Vip3Aa 的结构和功能，阐明其杀虫机理提供新的科学依据。