中文摘要：

长期以来，糖尿病视网膜病变（DR）研究的重点在于微血管病变。近年来的研究表明DR神经元的损伤发生在微血管改变之前，因此重视对视网膜神经细胞的防护对于早期DR的防治具有重要意义，目前相关研究尚处于初期阶段。本课题组长期采用中医药对DR进行防治，提出"心肾论治早期DR"的新思路，并在此新辨证思路的指导下创立密蒙花方，临床上取得良好疗效。在此基础上本课题拟以STZ性DM大鼠，大鼠视网膜神经节细胞，视网膜Muller细胞为研究对象，从在体动物实验，离体细胞实验两个方面，利用RT-PCR，Western blot,激光共聚焦，信号转导等技术，研究密蒙花方对早期DM大鼠视网膜神经细胞病变的保护作用，并从谷氨酸代谢，对Sigma受体的调控等方面探讨其防治DR早期视网膜神经细胞损伤的作用机理，为临床实践提供科学依据。

结论摘要：

目的通过在体及离体实验探讨中药密蒙花方防治DR早期视网膜神经损伤作用。方法一、建立糖尿病大鼠模型，密蒙花方灌胃治疗，检测视网膜功能，形态学观察，检测视网膜谷氨酸含量，神经节细胞凋亡，视网膜GFAP、GS， GLAST, NMDA含量，视网膜Sigma-1R, BDNF，CNTFmRNA及蛋白水平。二、密蒙花方含药血清作用于高糖状态下的大鼠视网膜神经细胞，检测细胞增殖状态，细胞凋亡率，细胞超微结构，细胞内GFAP、GS，GLAST, NMDA含量。细胞内Sigma-1R ,BDNF，CNTFmRNA及蛋白水平。结果一、1、模型组大鼠Ops、ERGb波随时间延长波幅逐渐降低，中药组较模型组OPs、ERGb波幅升高,有统计学意义。2.模型组视网膜结构紊乱，神经节细胞数目减少。中药组病理改变较模型组减轻。3．RGC凋亡模型组较正常组RGC凋亡增加，中药组较模型组凋亡减少。4.视网膜谷氨酸含量模型组较正常组含量增加，阳性组与中药组谷氨酸含量较模型组降低，有统计学意义。5.视网膜GFAP、GS， GLAST, NMDA含量与正常组比，模型组GFAP、NMDA表达增强，GS、GLAST表达减少。与模型组比，中药组GFAP、NMDA表达减少，GS、GLAST表达增强。6.视网膜Sigma-1R, BDNF，CNTFmRNA及蛋白水平模型组较正常组BDNF、CNTF 及Sigma-1R mRNA及蛋白水平降低。中药组较模型组BDNF、CNTF 及Sigma-1R mRNA及蛋白水平升高。二、1.高糖状态下，RGC增殖受到抑制，Muller细胞反应性增生，含药血清具有促进RGC增殖，抑制Muller细胞增生作用。2.高糖下，RGC凋亡增加，Muller细胞凋亡降低，中药组较模型组RGC凋亡降低，Muller细胞凋亡率高。3.高糖下Müller细胞GFAP、NMDA表达升高，GS、GLAST表达降低，中药组较高糖组GFAP、NMDA表达降低，GS、GLAST表达升高。4、细胞内Sigma-1R,BDNF，CNTF含量高糖组较正常组BDNF、CNTF及Sigma-1R mRNA及蛋白水平降低。中药组较高糖组BDNF、CNTF 及Sigma-1R mRNA及蛋白水平升高。结论DR视网膜神经损伤发生在微血管之前，密蒙花方可抑制DR早期视网膜神经损伤。