本课题拟通过体内及体外研究,利用Real-time PCR技术,流式细胞仪,荧光共振能量转移等分子生物学及免疫化学技术,旨在1)探讨FHL2在体内及体外人牙髓牙本质复合体的表达模式,初步分析FHL2在牙本质形成中的作用。2)通过研究过表达及阻断FHL2对成牙本质细胞分化及矿化能力的影响,为分析FHL2在牙本质形成中发挥的作用提供直接证据。2)通过分别检测FHL2与Runx2,integrin及IGFBP-5蛋白在成牙本质细胞中的表达关系及它们之间的相互作用,探讨FHL2的信号路径及作用机制。本课题通过深入研究FHL2在牙本质形成中的作用及其信号路径机制,加深对牙本质形成分子机制的了解和认识,为今后临床上牙损伤修复提供理论指导。
Four and a half lim domains;dentin formation;pulp-dentin complex;;
本课题通过体内及体外研究,利用Real-time PCR技术,Western blot及免疫共沉淀等分子生物学及免疫化学技术,1)探讨了FHL2在体内及体外人牙髓牙本质复合体的表达模式,发现FHL2在牙胚发育、正常及病理状态下离体人牙的成牙本质细胞分化过程中均呈阳性表达,推测FHL2在牙本质形成中可能发挥了一定的作用。2)检测FHL2基因转染对牙本质形成的调控作用,结果表明FHL2过表达可以促进成牙本质细胞分化及矿化相关分子ALP、BSP、OPN的上调及矿化结节的形成,促进牙本质的形成。2)利用免疫荧光、免疫共沉淀技术检测FHL2与Runx2在成牙本质细胞中的表达关系及它们之间的相互作用,探讨FHL2的信号路径及作用机制。本课题通过深入研究FHL2在牙本质形成中的表达、作用及其信号路径机制,加深对牙本质形成分子机制的了解和认识,为今后临床上牙损伤修复提供理论指导。