中文摘要：

组织激肽释放酶（TK）、缓激肽 (BK) 系统与心肌梗死（MI）后血管生成密切相关。BK及其B2受体调节内皮祖细胞（EPCs）归巢。干细胞移植后大量死亡是导致移植治疗MI后疗效欠佳的首要问题。本研究在申请者上一个国家自然科学基金（组织激肽释放酶促进内皮祖细胞参与心肌梗死后血管生成，30871071，小额）项目的研究基础上，拟通过BK预适应、信号传导通路中多个调控单元的阻断和激动、蛋白芯片等方法，探讨BK预适应改善EPCs抗缺氧诱导凋亡的能力及提高其旁分泌功能，并研究其涉及的信号传导通路，阐明其作用机制。通过裸鼠MI模型，移植BK预适应后的EPCs及其上清，动态近红外光学成像及微磁共振活体示踪，观察EPCs 存活、心肌血液灌注及心功能的改变，以验证BK预适应促进EPCs的修复功能。改善EPCs功能对提高干细胞治疗MI具有重要的理论意义和实用价值。

结论摘要：

1.通过缓激肽（BK）预适应内皮祖细胞（EPCs），观察其对EPCs的活力及功能的影响。培养人脐血来源的hEPCs，予以不同浓度的BK预适应，观察BK预适应hEPCs的增殖作用。缺氧诱导hEPCs凋亡，观察不同浓度的BK预适应hEPCs的抗凋亡能力，并检测不同预适应时间干预下Akt磷酸化水平。结果显示 1nM、10nM BK预适应可显著增加hEPCs的增殖活力，并抑制hEPCs的凋亡；且BK预适应显著促进Akt磷酸化。结论 低浓度短时间BK预适应能够促进hEPCs的活力，显著提高抗凋亡能力。 2. 探讨BK预适应EPCs抗凋亡的分子机制。hEPCs给予10 nM BK预适应10min或先予以HOE140、LY294002及L-NAME预处理30 min 后给予BK预适应。缺氧诱导hEPCs凋亡。结果显示缺氧诱导12 h， BK预适应可显著提高hEPCs的抗凋亡能力，其作用可被HOE140、LY294002或L-NAME所阻断。BK PC抑制caspase-3的活化，增加Akt及eNOS的磷酸化。促进VEGF分泌。结论 BK预适应hEPCs的抗凋亡效应及促进VEGF分泌可能通过B2受体依赖的Akt- eNOS信号途径。 3. 以BK PC hEPCs移植裸鼠心肌梗死（MI）模型，研究BK PC hEPCs对MI的治疗及机制。建立小鼠MI模型，培养hEPCs并予BK PC及不同抑制剂，于建模后行心肌注射移植。超声检测心功能，免疫组化评价血管新生。共聚焦显微镜评价移植凋亡。结果显示BK PC组的心功能显著改善。减少MI面积。细胞经BK预适应可显著提高移植细胞存活，降低心肌细胞凋亡。BK PC hEPCs显著促进MI后血管新生，可被HOE140、LY294002及L-NAME阻断。结论 BK PC hEPCs移植显著改善MI后心脏功能，其机制是促进移植细胞存活、抗心肌细胞凋亡以及促血管生成。 4. 组织激肽释放酶(TK)-缓激肽系统（KKS）调节EPC功能参与MI后保护机制的研究。构建了腺病毒载体高表达TK，开展TK对EPC的增值、迁移、抗凋亡促血管生成的机制研究。研究显示TK能显著改善MI后心功能，其机制是通过增加EPC数量改善其促血管生成功能，其作用通过缓激肽B2受体依赖的Akt信号通路。发表基金标注论文13篇。其中SCI收录文章9篇。培养2名博士3名硕士。