中文摘要：

肾间质纤维化是大多数肾病走向终末期肾病所必经的途径。肾间质纤维化主要包括1）肾小管上皮细胞向肌纤维母细胞的转化，后者取代正常的肾小管上皮细胞而破坏正常肾组织结构2）以肌纤维母细胞为主的间质细胞过度分泌细胞外基质。本研究用最新的RNAi技术，利用组织特异性启动子构建肾小管特异性RNAi表达载体，阻断在肾小管上皮细胞转化过程中重要的Smad2/3信号转导途径，以延缓转化过程。同时结合本实验室已研发成功的，阻断纤维连接蛋白这一重要细胞外基质成分的RNAi载体，对肾间质纤维化的两条重要途径同时进行阻断，以期达到最佳的延缓肾间质纤维化进程的效果。组织特异性RNAi载体的构建，将使基因治疗技术更加准确、稳定。也为该技术快速进入临床奠定理论和实践基础。

结论摘要：

肾间质纤维化是大多数肾病走向终末期肾病所的共同途径。肾间质纤维化主要包括1）肾小管上皮细胞向肌纤维母细胞的转化，后者取代正常的肾小管上皮细胞而破坏正常肾组织结构；2）以肌纤维母细胞为主的间质细胞过度分泌细胞外基质。本研究应用RNAi技术，抑制了大鼠肾小管上皮细胞的Smad3信号转导途径，延缓了肾小管向成纤维细胞的转分化进程。我们利用超声微泡技术直接由肾静脉注射带有抑制Smad3的shRNA载体，克服了传统肾脏基因转染技术的低效率的问题，延缓了单侧输尿管梗阻模型的肾脏纤维化进程。同时我们应用RNAi技术，成功地发现可以高效率抑制大鼠纤维连接蛋白的siRNA 片段。体外研究发现通过抑制纤维连接蛋白可以使系膜细胞经过内源性凋亡途径死亡。另外，应用本研究开发的载体，我们也高效地抑制了系膜细胞connxin 43的表达，加速了细胞的衰老进程，我们还结合PCR技术将PolIII启动子加在靶序列之前，成功获得shRNA抑制内源性基因的表达。本研究成果为抑制肾脏纤维化进展和RNAi载体的开发起到了促进作用。