中文摘要：

O157:H7大肠杆菌的Vero毒素、金黄色葡萄球菌肠毒素和肉毒梭菌神经毒素是引起食物中毒的重要细菌毒素。拟将SLT-I和SLT-II、金黄色葡萄球菌肠毒素A和B及肉毒神经毒素C片段的基因，用linker连接，分别插入原核和真核表达载体中，提纯表达产物，免疫动物，获得多联融合毒素抗体。用所获得的抗体与相应的毒素分别进行免疫学测定，确定多联融合毒素基因表达产物抗体的免疫特性。由于这种抗体具有与几个毒素同时进行特异性反应的特点，为建立一种适用于食品中食物中毒菌毒素的同时快速扫描检测方法，奠定理论与实验基础。用这种抗体所建立的检测方法是在特异性的基础上，具有广谱的指示意义，在食品检测中具有良好的应用推广前景。如果表达产物具有良好的免疫原性，同时也为新型疫苗研制开辟新的手段。

结论摘要：

对于大批量食物样品检测或一般性食品卫生安全评价，需要短时间内判断食品是否有污染，必要时再进行精确检测，这在食品工业中具有重要的经济意义，在食品卫生与安全上有时甚至比精确检验意义更大。本研究将大肠杆菌Vero毒素(VTs)、金黄色葡萄球菌肠毒素(SEs)、肉毒梭菌神经毒素(BoNTs)三种细菌的多个毒素基因片段用linkers(GPGPG或Gly4Ser)串联起来(Hc1-VT1B-SEA-VT2B-SEB1，VT1B-SEA-VT2B-Hc2-SEB2和SEB1-SEB2-SED1-SED2-SEE)，获得2937bp、2348bp和1833bp三个融合毒素基因，并在pET-22b 和pET-28a中获得可溶性和包涵体三种表达产物；免疫家兔，得到抗多种毒素的血清抗体；所获抗体与多种相应毒素表现了非常高的特异性和反应敏感性；利用该抗体初步建立了食物中毒菌毒素的广谱ELISA 和胶体金检测方法。本研究的目的是利用多基因抗原串联，以基因工程方式获得多抗原蛋白，免疫动物获得广谱抗体，探索建立食品的广谱、快速的免疫学检验方法的可行性。通过本试验证明这是可行的，值得进一步研究探讨。