转基因克隆动物及辅助生殖技术的发展都需要以大量优质的卵母细胞为材料,但问题是目前体内取卵数量有限,体外培养卵母细胞的质量又不能满足要求。因此,当务之急是提高体外成熟卵母细胞的质量,而达到此目的必须有充分的基础理论为指导。本研究涉及到的促减数分裂甾醇(MAS)可能就是卵母细胞成熟过程中一种关键的调节物质,研究显示它能显著提高成熟卵母细胞的质量和早期胚胎发育能力,但目前还不能确定其作用的机理以及其作用是否是生理性的。本项目从研究卵母细胞成熟调控机理入手,拟使用促性腺激素诱导的卵泡和卵母细胞培养模型,用气-质联用方法检测近年来发现的能够促进卵母细胞成熟的物质MAS的产量,用免疫印迹、免疫组化和Northern技术检测合成MAS的酶CYP51基因和蛋白的表达,并进一步研究MAS在此过程中和PKA及MAPK通路之间的关系,阐明MAS在上述过程中的功能及其机制。为提高卵母细胞体外成熟的质量提供理论基础
转基因克隆动物及辅助生殖技术的发展都需要以大量优质的卵母细胞为材料,但问题是目前体内取卵数量有限,体外培养卵母细胞的质量又不能满足要求。因此,当务之急是提高体外成熟卵母细胞的质量,而达到此目的必须有充分的基础理论为指导。本研究涉及到的促减数分裂甾醇(MAS)可能就是卵母细胞成熟过程中一种关键的调节物质,研究显示它能显著提高成熟卵母细胞的质量和早期胚胎发育能力,但目前还不能确定其作用的机理以及其作用是否是生理性的。本项目从研究卵母细胞成熟调控机理入手,拟使用促性腺激素诱导的卵泡和卵母细胞培养模型,用气-质联用方法检测近年来发现的能够促进卵母细胞成熟的物质MAS的产量,用免疫印迹、免疫组化和Northern技术检测合成MAS的酶CYP51基因和蛋白的表达,并进一步研究MAS在此过程中和PKA及MAPK通路之间的关系,阐明MAS在上述过程中的功能及其机制。为提高卵母细胞体外成熟的质量提供理论基础。