选择来自SPF鸡群的种蛋,经无菌处理后采用无菌孵化,转入3台不同无菌隔离器内饲养,并分别饲喂经钴60辐射灭菌的无菌饲料(CT)、无菌料+乳酸杆菌培养液(LB)、或无菌饲料+鸡肓肠微生物(CON)。饲养3周后屠宰取样(每组8只),从十二指肠、空肠、回肠取食糜测定葡萄糖、叶黄素、脂肪酸和淀粉酶和脂肪酶,各肠段测定形态结构,取血液测定葡萄糖、乳糜微粒、VLDL、HLDL、TG和胆固醇含量,取空肠和回肠组织用RT-PCR测定脂肪酸结合蛋白(FABP)、G蛋白偶联受体-4(GPR4)和PPAR等mRNA表达量、取肝脏、脂肪组织测定ACC1、FABP、LPL、FAS等mRNA的表达量。试验二选SPF种蛋无菌孵化后,分3组分别饲喂无菌饲料(CT)、LB饲料和COV饲料,7日龄后各组加入沙门氏菌,1周后屠宰取肠道组织用ELSA测定SIgA,取血清测定IgA IgM TNF-a和IL-6和IL-10含量.
chicken;intestinal microflora;lipid;immunity;gene express
为研究鸡肠道菌群对宿主营养代谢和肠道免疫功能的影响,选择来自SPF鸡群的种蛋,经无菌孵化后,进入无菌隔离器内饲养,建立“无菌鸡”饲养模型。分别饲喂经钴60辐射灭菌的无菌饲料(CT)、无菌料+乳酸杆菌培养液(LB)、或无菌饲料+鸡肓肠微生物(CON)。饲养3周后屠宰测定各组织器官的发育,血液生化指标,空肠、肝脏和脂肪组织的相关基因的表达量。结果显示,肠道菌群能促进雏鸡十二指肠和空肠长度增加,使十二指肠、空肠和回肠隐窝深度降低、绒毛高度/隐窝深度增大;但盲肠长度和体积均显著低于无菌鸡。此外,肠道菌群还促进脾脏的发育,提高仔鸡腹脂率、肌胃率和肝脂率及免疫器官指数(P<0.05);提高血清总蛋白、白蛋白、血糖及甘油三酯浓度,但显著降低血清胆固醇、高低密度脂蛋白浓度(P<0.05)。无菌鸡添加乳酸菌和盲肠内容物后,降低空肠组织FAS基因mRNA水平(P<0.05),并提高L-FABP基因mRNA表达量(P>0.05);提高肝脏组织SREBP-1、ChREBP基因mRNA水平(P<0.05),提高仔鸡脂肪组织THRSP、PPARγ和LPL等基因其mRNA水平表达量(P<0.01)。试验结果说明肠道菌群可调控脂肪代谢相关基因的表达,进而影响雏鸡脂类代谢。试验二选SPF种蛋无菌孵化后,分别饲喂无菌饲料(CT)、LB饲料和COV饲料,21日龄后接种新城疫疫苗。免疫注射后,肠道菌群能显著提高了鸡血清中ND抗体水(P<0.05),降低免疫前期(1-7天)血清中总蛋白、白蛋白、IgG和IgM含量(P<0.05)。降低疫苗7天后十二指肠黏膜SIgA的分泌量降低(P<0.05),对后期(14天)十二指肠和空肠黏膜SIgA没有影响不大。表明肠道菌群对新城疫免疫注射后仔鸡免疫功能产生一定影响。