中文摘要：

解析登革病毒(DENV)成熟释放的基本过程是登革防治的重要理论问题。前期研究中我们发现调控高尔基体到细胞膜囊泡运输的Rab8参与DENV成熟释放过程，而干预与之伴随的肌球蛋白5c对病毒成熟释放的影响远不及干预前者。DENV成熟释放是一种分步骤的囊泡运输过程，再循环内体是病毒从高尔基体出芽后的重要阶段。根据研究结果，我们推测再循环内体标志分子Rab11a可能通过FIP2与Rab8调控的运输相互排斥或协同，连接带有病毒的再循环内体和肌球蛋白5b，使子代病毒沿细胞骨架向细胞膜方向移动，参与DENV成熟释放过程。故本研究拟通过电镜、激光共聚焦、RNA干扰、过表达、免疫共沉淀等技术，明确①DENV感染与Rab11a-再循环内体的时空关系，②Rab11a-再循环内体在DENV感染中的作用，③Rab11a参与DENV成熟释放的主要协同分子，揭示病毒高效释放的分子机制，为DENV感染控制提供新思路。

结论摘要：

本项目研究基本按照原研究计划书执行，完成其中绝大部分内容，仅对原研究计划中的部分内容作适当调整。通过本项目，我们发现DENV2能够感染人胎肝细胞株L02，Rab11a与病毒抗原在胞内部分区域共存；用过表达Rab11a负突变体和RNA干扰的方法扰乱胞内Rab11a的功能可以显著抑制细胞内外子代病毒的生成；而干扰与Rab11a相互作用的两种分子Rab11aFIP2和GDI2也能抑制细胞内外子代病毒的生成；Rab11a和Rab11b并未参与病毒进入细胞的过程，表明之前过表达Rab11a负突变体和干扰Rab11a导致病毒滴度显著降低并非病毒进入细胞数量减少所致；过表达Rab11a野生型、正负突变体可以影响DENV2的RNA复制，之前检测到的Rab11a负突变体介导的DENV2滴度降低除了抑制病毒胞吐释放之外还与病毒复制减少也有一定关联，而过表达Rab11a野生型则有利于DENV2病毒复制；Rab11a可能通过与Rac1、Nck1和α-Chn等分子之间的相互作用调控DENV2感染过程。在成果方面，已发表SCI研究论文2篇，另有1篇在准备中；参加国内学术会议1次。