中文摘要：

肺癌是死亡率世界第一的恶性肿瘤，治疗效果仍较差。溶瘤病毒治疗肿瘤是一种最新的生物治疗方法，在部分肿瘤临床试验中获得了较好的疗效，但仍存在适用范围小、给药途径少，存在肿瘤类型敏感性差异等缺陷。本课题组前期构建了增殖能力受四环素严密调控的HSV 病毒株KTR27，可以有效的在体内体外试验中杀伤肺癌细胞。在此基础上，我们发现KTR27 包膜糖蛋白自发突变，可以使宿主细胞融合周围细胞形成融合体。通过理论分析和实践检验，我们发现具有融合能力的病毒株可以更高效地在肿瘤内增殖，突破组织内屏障，更有效的杀伤肿瘤细胞，弥补现有治疗中的不足。本研究通过在KTR27 基础上定向培养筛选适于肺癌治疗的自主突变株KTR27-F。在体外细胞系、实体肺癌组织、体内裸鼠/小鼠模型中，检测病毒治疗的有效性，调控性和安全性。构建一株杀伤能力强，安全性高，可控性强，可以采用多种方式给药的治疗用病毒株，为肺癌病毒治疗做好基础工作

结论摘要：

肺癌是死亡率世界第一的恶性肿瘤，治疗效果仍较差。溶瘤病毒治疗肿瘤是一种最新的生物治疗方法，在黑色素瘤、淋巴瘤等肿瘤临床试验中获得了较好的疗效，但仍存在适用范围小、给药途径少，存在肿瘤类型敏感性差异等缺陷。本课题组前期构建了增殖能力受四环素严密调控的HSV 病毒株KTR27，可以有效的在体内体外试验中杀伤肺癌细胞。在此基础上，我们发现KTR27 包膜糖蛋白自发突变，可以使宿主细胞融合周围细胞形成融合体。通过理论分析和实践检验，我们发现具有融合能力的病毒株可以更高效地在肿瘤内增殖，突破组织内屏障，更有效的杀伤肿瘤细胞，弥补现有治疗中的不足。本研究通过在KTR27 基础上定向培养筛选适于肺癌治疗的自主突变株KTR27-F。通过体外细胞系试验，在肺癌细胞系A549、GLC82、H446等多种不同来源的肺癌细胞系中进行筛选，从多大50种自发产生的融合性HSV溶瘤病毒株中，筛选出3株具有强增殖能力，在肺癌，特别是肺腺癌细胞系中能够有效融瘤生长的HSV-KTR27-F1，HSV-KTR27-F2，HSV-KTR27-F3，三株不同的病毒株。在实体肿瘤研究中，通过获取新鲜人肺癌组织标本，并进行组织培养及HSV注射感染，三株病毒株都获得了理想的增殖和融瘤效果。并且，对于四环素调控具有敏感性，在有/无四环素调控模式下，病毒增殖能力相差10000倍，说明具有很好的可调控性。但在裸鼠体内模型研究中，并未获得预期结果，特别是尾静脉注射、静脉给药组，未获得理想的控制肿瘤效果，HSV病毒在肿瘤中的分布未达到理想结果，故此，需要进一步研究，改善病毒特异性结构，增加KTR27F对于肿瘤细胞的感染亲和力。总之，本研究构建一株了杀伤能力强，安全性高，可控性强的肺癌（腺癌）治疗用病毒株，为肺癌病毒治疗做好基础工作，但给药途径仍局限于局部注射给药，下一步研究需要针对HSV的对肿瘤特意亲和力和侵袭性加大研究力度。