中文摘要：

采用多种分子生物学实验技术，在建立人类肿瘤坏死因子受体-2（TNF-RⅡ）表达载体的基础上，对TNF-RII转基因后TNF-α诱导头颈鳞癌细胞凋亡的效应进行探讨。通过瞬时表达TNF-RII基因并建立TNF-RⅡ转基因稳定表达细胞克隆和活体移植瘤动物模型，确立应用TNF-RⅡ转基因结合TNF-α局部应用杀伤头颈鳞癌细胞的各种实验条件和方法，为头颈鳞癌的基因治疗开辟新的方法。为本研究领域内的开创性研究，对指导头颈肿瘤的基因治疗，改善并提高头颈鳞癌的治疗效果和预后具有重要的理论和实际应用价值。

结论摘要：

首先利用免疫组织化学及原位末端标记法检测了喉鳞状细胞癌和Hep2细胞株TNFR和其转导蛋白TRAF2的表达，结果发现大多数人喉鳞癌组织表达TNFR1而缺乏TNFR2的表达，缺乏表达TNFR2可能对喉癌的发生发展有一定作用，提示我们若将TNFR2基因转入肿瘤细胞内可能对喉癌起到一定的治疗作用。然后利用Lipofectamine 2000介导，将外源性TNFR2基因导入Hep-2细胞，利用绿色荧光蛋白协同转染实验显示外源性TNFR2被导入细胞，免疫组织化学法及流式细胞仪对外源性TNFR2基因的表达情况进行鉴定，证实TNFR2表达增强；利用结晶紫染色及流式细胞术检测转染TNFR2基因的Hep-2细胞对TNFα的敏感性?, ，显示TNFR2转染增强TNFα对Hep-2细胞的抑制率和凋亡率。制备荷瘤裸鼠模型，检测TNFR2瘤内转染的最佳剂量和表达的时间，按照此剂量和时间间隔将TNFR2瘤内转染，同时给予TNFα瘤内注射，结果证明转染TNFR2基因明显增强TNFα的促凋亡作用，因此，转染TNFR2基因可成为肿瘤基因治疗的新方法?。