中文摘要：

为了通过转基因对蚕蛹发育进行控制，实现鲜茧缫丝，构建了基于piggyBac转座子的转基因载体，该转载体具有hsp启动子控制BmKIT3或egt基因表达盒和ie-1启动子控制neo基因表达盒；用精子介导法将载体导入蚕卵，通过GFP和G418抗性双重筛选，结合PCR、点杂交等分子生物学鉴定获得了转基因家蚕。结果显示带有hsp20.4-BmKIT3表达盒的转基因家蚕产卵数减少，卵孵化率降低，在G3代不同转基因系统中，平均孵化率为62.5%，存活率约为46.84%，15.94%存活的蛹在化蛾前死亡，死亡蛹干瘪不腐烂。在G4代，约99%蚕在3龄前死亡，western blot可检测到BmKIT3在转基因家蚕中的表达；带有hsp23.7-egt表达盒的转基因家蚕在G1代，蚕卵的孵化率为32% - 52%，幼虫阶段蚕发育相差1-2个龄期，部分蚕因不能蜕皮而死亡。有近25%的蚕蛹发育中止，蚕蛹发育推迟2-4天，未化蛾蛹干瘪不腐烂。表明hsp启动子具有组成型表达特征，蛹期特异性表达BmKIT3或EGT可以中止蚕蛹的发育。另外，还构建了GAL4/UAS双系统，发现BBX-B8过量表达导致蜕皮次数增加。