中文摘要：

申请人一直致力于肝癌的分子生物学、基因组学、蛋白质组学以及靶向治疗研究。期间，申请人完成了肝癌组织和癌旁组织的蛋白组组学表达谱，发现了如Mortalin、Vimentin等肿瘤标记物；构建了300例HCC病人及肝硬化、正常肝组织的基因组学（SNP芯片和mRNA芯片）表达谱以及miRNA表达谱数据库，发现了（1）预示肝癌术后早期复发的基因标签（gene signature）；（2）调控肝癌细胞糖酵解和氧化磷酸化的关键miRNA - - miR-122；（3）印记域DLK-DIO3的miRNA簇与肝癌干细胞表型、肝癌预后相关。在本课题中,申请人将深入miR-122在肝癌代谢方面的前期研究成果证实miR-122对糖酵解和氧化磷酸化相关基因的调控作用；下调的miR-122通过影响细胞线粒体能量代谢,促进肝癌细胞在乏氧环境中生长；恢复miR-122表达可以抑制肝癌细胞生长，可能成为肝癌治疗的新靶点。

结论摘要：

背景细胞生物能量学的改变是细胞发生恶性转化的关键性标志之一。肿瘤细胞通过提高细胞内无氧糖酵解水平，为细胞提供能量，并在周围组织中堆积大量的乳酸，破坏正常组织微环境，为肿瘤转移侵袭提供有利条件。这种代谢模式被称为“瓦伯格效应”。miR-122 是肝特异性miRNA。我们的前期研究发现miR-122 是癌旁组织中表达最高的miRNA，在肝癌组织中miR-122 表达显著降低；miR-122调控的部分靶基因与细胞内糖酵解和氧化磷酸化的代谢活动相关，PKM2正是其中之一。在本研究中我们将进一步明确在肝癌中miR-122对PKM2的调控机制，以及相关的细胞功能变化。方向miR-122对PKM2的调控机制及该调控对肝癌细胞功能学的影响。主要内容我们首先通过过表达miR-122的方法经乳酸含量测定实验、活性氧检测实验和不同氧含量状态下测定细胞增殖率实验明确miR-122对肝癌细胞代谢的影响；其次基因芯片证实了miR-122表达水平与PK表达水平呈负相关，且PK的表达水平与肝癌病人的预后显著相关；通过miR-122过表达和miR-122抑制剂介导的低表达方法，证实了PKM2的mRNA和蛋白表达与miR-122呈负相关；最后通过共转染的方法证实了PKM2介导miR-122对肝癌细胞的代谢影响。科学意义通过这些研究，我们证实了在标书中提出的科学假说miR-122 是一个重要的线粒体糖酵解和氧化磷酸化水平的调控因子，它降低糖酵解相关酶PKM2表达从而减低肝细胞内糖酵解水平和增殖能力；在肝癌细胞内高表达miR-122 可以抑制肝癌细胞的生长。我们的研究结果初步探讨了miR-122作为治疗靶标的前景，并从改善肿瘤代谢的角度为靶向治疗领域找到一个新的治疗靶标。