本项目在前人及本课题组前期研究工作的基础上,利用体内法与体外法研究壳聚糖对断奶仔猪卵清白蛋白抗体滴度、外周血淋巴细胞亚群、相关免疫细胞因子等免疫指标及血清和淋巴细胞培养液中一氧化氮(NO)、花生四烯酸(AA)和相关酶、激素等指标的影响,并借助分子生物学手段检测断奶仔猪肠道组织和淋巴细胞培养体系中诱导型NO合酶(iNOS)和磷脂酶A2(PLA2) mRNA丰度,在细胞和分子水平上,分别从NO途径和AA途径探讨壳聚糖对断奶仔猪免疫功能的调控机理,并根据免疫功能及生长性能指标,确定壳聚糖在断奶仔猪日粮中的适宜添加剂量。项目的完成对深入了解壳聚糖对断奶仔猪免疫机能状态的调控机理具有重要的学术价值,为科学应用天然绿色的壳聚糖添加剂提供理论依据,在生产中具有重要的实践指导意义。
Chitosan;Weaned piglets;Immunity;Inducible Nitric Oxid Synthase;Cytosolic Phospholipase A2
本项目结合体内法和体外法从细胞和分子水平探讨了壳聚糖对断奶仔猪免疫功能的影响机制。结果表明(1)壳聚糖可提高断奶仔猪血清中IgG和特异性OVA抗体滴度及小肠黏膜中sIgA的水平,这表明壳聚糖可促进仔猪体液免疫功能;(2)壳聚糖可增加血清IL-1、IL-2和TNF-α并且降低了sCD4和sCD4的水平,说明壳聚糖可促进仔猪的细胞免疫功能;(3)壳聚糖不仅可提高仔猪血清NO含量、诱导性NO合酶(iNOS)活性和小肠iNOS mRNA的表达,而且提高了其外周血单个核细胞中NO含量、iNOS活性和iNOS mRNA的表达,这表明壳聚糖可从NO途径来影响仔猪的免疫功能;(4)壳聚糖不仅增加了仔猪血清中胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)、花生四烯酸(AA)、环氧合酶(COX-2)、脂氧化酶(5-LOX)、前列腺素E2(PGE2)和白三烯B4(LTB4)浓度及小肠cPLA2、COX-2和5-LOX mRNA表达,而且增强仔猪外周血单个核细胞cPLA2、AA、COX-2、5-LOX、PGE2和LTB4的浓度及cPLA2、COX-2和5-LOX mRNA的表达,这表明壳聚糖可通过AA途径影响仔猪免疫功能。