中文摘要：

二氢青蒿素（DHA）可能通过直接抑制内质网钙泵SERCA诱导结肠癌细胞复杂的凋亡信号网络反应，而且DHA对SERCA的抑制可能具有铁离子依赖性。本课题拟通过siRNA文库筛选DHA诱导结肠癌细胞凋亡的关键蛋白；利用实时PCR微阵列分析青蒿素诱导的表达野生型和突变型(DHA非敏感型)SERCA结肠癌细胞的凋亡基因差异表达；体外解析DHA和铁离子对野生型和突变型SERCA反应动力学的影响。从而确定DHA诱导结肠癌细胞凋亡的重要信号分子，建立对DHA诱导结肠癌细胞凋亡网络较全面的认识，解读SERCA在DHA分子和细胞水平作用机制中所承担的角色。并期待在纵深拓展青蒿素药物作用机制研究的同时，为抗肿瘤中药的研究提供新思路和开辟新途径。

结论摘要：

二氢青蒿素（DHA）可能通过直接抑制内质网钙泵SERCA诱导结肠癌细胞复杂的凋亡信号网络反应，而且DHA对 SERCA的抑制可能具有铁离子依赖性。目前其确切机制不清楚，有待探讨。本课题拟通过siRNA文库筛选DHA诱导结肠癌细胞凋亡的关键蛋白；利用实时PCR微阵列或Western分析青蒿素诱导的表达野生型与突变型（DHA非敏感型）SERCA结肠癌细胞的凋亡基因差异表达。期望通过本研究全面解析DHA在HCT116细胞诱导凋亡信号网络的关键蛋白、途径及期间的关系；从细胞水平及分子水平阐明SERCA在DHA促凋亡机制中承担的角色。从而确定DHA诱导结肠癌细胞凋亡的重要信号分子，建立对DHA诱导结肠癌细胞凋亡网络较全面的认识，解读SERCA在DHA分子和细胞水平作用机制中所承担的角色。并期待在纵深拓展青蒿素药物作用机制研究的同时，为抗肿瘤中药的研究提供新思路和开辟新途径。方法应用ELISA 检测不同浓度DHA处理HCT116细胞后SERCA活性;:利用Western分析青蒿素诱导的表达野生型与突变型（DHA非敏感型）SERCA结肠癌细胞的凋亡基因差异表达; 构建siRNA文库；siRNA文库筛选DHA诱导结肠癌细胞凋亡的关键蛋白。结果: ① DHA诱导HCT116细胞凋亡。 ② CHOP在DHA诱导HCT116细胞凋亡中高表达。 ③ siRNA沉默CHOP表达后，细胞凋亡被抑制。 ④ DHA诱导HCT116细胞凋亡时SERCA2b活性被抑制。 ⑤ 余见正文. 结论:DHA诱导HCT116细胞凋亡涉及内质网应激、死亡受体介导和线粒体途径等复杂的分子机制. 本研究揭示内质网应激是DHA诱导HCT116细胞凋亡的始动机制!!但二氢青蒿素（DHA）与SERCA分子结合位点及SERCA分子调控的上下游关系.凋亡的信号网络等有待进一步探讨。