新型结核疫苗AdAg85a已进入临床,但在宿主肺部细菌感染病理情况下的免疫保护作用及相关机理仍不清楚。本课题拟探讨TLR2或TLR4的激活对Ad5Ag85a吸入免疫小鼠气道腔内抗原特异性T淋巴细胞数目和功能之影响以及影响背后的机制,同时了解此种激活对疫苗针对结核杆菌保护作用的影响。方法学上拟以TLR2配体PGN或TLR4配体LPS暴露于AdAg85a吸入免疫BALB/c小鼠气道,或体外刺激AdAg85a免疫小鼠的气道腔内细胞,在不同时间点用四聚体技术检测气道腔抗原特异性CD8 T细胞数目,用细胞内细胞因子染色技术探测产生γ干扰素的CD4及CD8 T细胞数目,用ELISA法探讨气道腔内各细胞因子及化学素释放情况,同时通过结核菌培养了解结核杆菌攻击后免疫小鼠的肺脾菌落变化,最后以CFSE示踪、FTY720淋巴细胞供应阻断及TLR2或TLR4流式抗体染色等技术探索气道内T淋巴细胞变化之机理。
英文主题词tuberculosis;airway luminal T cells;vaccine;TLR2;TLR4